shanghainese

引用:

原帖由 zhousjplasur 于 2008-12-3 00:12 发表
在此请教：

就一个IHC完整的程序来讲，必须要设阳性对照片和阴性对照片（已知确定组织无检测抗原）吗？另外好像有非常多的阴性对照种类，诸如空白对照，同型对照（看了shanghainese的那个同型对照帖子，仍未明了） ...

• 第一个问题是抗体特异性问题。　抗体应该只与阳性细胞反应，不应该与其他的阴性细胞反应。　如果抗体与其他的阴性细胞反应了，说明这个抗体的特异性有问题，不能用。　病理科医生应该了解所作抗体的特异性和在组织细胞里的分布。　不然无法看片子做诊断。　研究生也一样。
• 阴性对照最好用同型对照。　它的目的是检测抗体本身免疫球蛋白，二抗，Streptavidin-HRP和DAB对组织切片上的非特异性着色。

shanghainese

引用:

原帖由 zhousjplasur 于 2008-12-3 11:02 发表
三个问题：
1、以pbs作为空白对照也应该能检测二抗，Streptavidin-HRP和DAB对组织切片上的非特异性着色？
2、“检测抗体本身免疫球蛋白对组织切片上的非特异性着色”，此话何解？是指检测血清中除外一抗以外其它免 ...

回答：

• pbs作为空白对照也应该能检测二抗，Streptavidin-HRP和DAB对组织切片上的非特异性着色。
• “检测抗体本身免疫球蛋白对组织切片上的非特异性着色”，是指检测一抗自身的免疫球蛋白对组织切片上的非特异性着色。
• 一抗都是多克隆兔抗人的一抗，应该以兔血清作为同型对照。