【求助】关于免疫组化阳性、阴性对照，以及图像分析问题
各位老师好，我现在做大鼠变应性鼻炎模型鼻粘膜中蛋白A的免疫组化，想看看正常组和患病组有无差别。现在国内外没有找到别人报道过，由于经费不够，所以没有没有用ELISA，预实验发现正常组和患病组都有着色（EnVision二步法），问题是：
1、阳性对照和阴性对照都需要做吗？（阳性对照是鉴别假阴性的是吧？既然两组全有表达，是不是阳性对照就不要了？）如果需要，该怎么 设计对照？
2、结果我需要取五个视野，数阳性细胞个数进行统计分析，由于蛋白A可能在多种细胞中表达，那到时候我是不是要分类计数阳性细胞？听说图像分析系统可以进行免疫组化结果统计分析（好像是什么灰度值），不知道南京地区有没有
学生初次做免疫组化，很多不是很懂，恳请各位老师的指点，学生先谢了
