大志

技术方面：加热预处理的温度和时间；消化时间的长短；加热共变性时杂交液的蒸发；杂交后洗涤是否干净；苏木精对比染色的深浅。
注意事项：加热预处理的温度保证在98oC以上，最好完全煮沸，时间15min；具体消化时间因组织的固定时间、固定方式、切片的厚度而异，建议消化时间5～30min；杂交液滴加后，必须覆盖杂交膜，再用封片胶密封；杂交后洗涤温度最低应在75oC以上，最高不超过80oC；苏木精对比染色不可过深，否则会遮盖杂交信号。
最关键的、最困难的是消化时间的掌握，消化不足会影响杂交效果，消化过度会破坏组织形态。