刘星雨

我是做骨组织形态方面研究的，观察钙化的情况多用甲苯胺蓝染色法，因钙化程度不同染成深浅不一的蓝色，并与脱钙的HE作对照，相信也能用于牙体根管里的钙化物的观察。用锯式切片机（Leica SP1600），将样本切（锯）成几十至几百μm后，再用磨片机打磨、抛光，可作表面染色或直接观察（厚片CLSM）；还可继续用重型切片机切薄片（Leica　SM2500），作特殊染色，观察细节。还有更好的方法，是用活体荧光标记新骨形成，根据你的实验要求，在取材前注入荧光剂，锯片后直接看。但最好是用激光共聚焦显微镜观察，荧光显微镜也能看得到，但效果差些。

刘星雨

甲苯胺蓝染色法染不脱钙骨切片时，除骨组织外其他软组织也会染上不同程度的蓝色或无色，但很容易区分，尤其是软骨、软骨下骨和骨组织相连处，因钙沉积的量不同有极明显的差别。活体荧光标记新骨形成是骨外科及口腔科常用的标准方法，注入的荧光剂与游离钙发生螯合反应沉积在骨中，根据钙化的程度不同呈现不同强度的荧光，无钙沉积处均不显色。这些方法在SCI收录的文献中有较多的报道。