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请教大鼠脱水问题

不知你的标本块多大,按照常规标本大小看,100%酒精的时间有些长了,会导致标本变脆。
另外,正丁醇的作用是脱水兼透明,其作用相对二甲苯要缓慢的多,时间有些不够。
不知TM试剂是什么,但浸蜡时间也显得少,因为正丁醇在石蜡液中被置换的速度慢。
切片的厚度要注意,尤其是肝、脾等组织,一般5um。

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大鼠肝脏和胰脏标本(1cm×1cm×0.5cn)的手工处理过程:
70%、80%、90%酒精不少于3~4小时,最好中间换一次新酒精。95%酒精过夜。
次日,100%酒精2小时,期间换新酒精1~2次,二甲苯1.5小时,中间换一次,以标本透明好为准,胰脏可能比肝脏透明要快一些。浸蜡(58~60度蜡)1.5小时,与二甲苯时间相同,中间换新蜡液1~2次,包埋。
若是采用正丁醇透明,时间要长一些,同样的标本块是皮肤,则需要透明5~6小时,以透明好为准,浸蜡也需3~4小时,期间要多次更换新蜡液,以置换正丁醇。
切片很脆,有时可能是浸蜡时间不够所致,标本内透明剂存留较多也会影响切片的质量,有时标本脱水不彻底也会使切片发脆、发碎。另外,石蜡内应加入一定量的蜂蜡,以增强石蜡的黏性,否则也会产生切片横裂的现象,还有切片刀的角度应在4~6度范围,过大也会使切片横裂。
相对肝脏(5um)而言,胰脏非常好切片。

[ 本帖最后由 zhaoying241 于 2007-6-3 22:18 编辑 ]

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