lengkudaod

本人刚参加工作一年，刚才浏览本站真的是很受教育，，我们这里技术都是师徒模式，，技术没有出去进修一说，记得刚开始老技术员告诉我的免疫组化过程是：（1）早上上班烤片（在电炉子上烤，时间控制完全凭经验，就是看到蜡烤化，在不烤糊这之间），（2）二甲苯3个，每个脱蜡15分钟。（3）用热水冲洗二甲苯（就是烧开的热水2个缸每缸30秒）。（4）蒸馏水冲洗3遍（每张片子覆盖蒸馏水后就甩干，中间没有间歇时间，后面水洗和PBS冲洗同此过程）。(5)滴加过氧化氢10分钟，蒸馏水洗3遍（师傅的解释是增强免疫组化的上色）。(6)高压修复（先将柠檬酸在高压锅里加热至沸腾，然后将切片置于锅内，个人觉得从片子放入锅内到高压锅喷气至少需要4-5分钟），高压锅喷气后2分钟。然后高压锅迅速放入自来水下冲洗2分钟左右，然后室温冷却。（7）PBS冲洗3遍，滴加相对应的一抗室温3小时左右（上午工作结束）(8)下午上班PBS冲洗3遍滴加二抗室温20—30分钟。(9)PBS冲洗滴加3抗室温20—30分钟，PBS冲洗。（10）滴加DAB染液3—5分钟，自来水冲洗。（11）苏木素复染4分钟，盐酸酒精分化，氨水反蓝，4个梯度酒精，3个二甲苯，封片。我们这里2002年就已经开展了免疫组化。这个步骤一直沿用至今。今年我将滴加过氧化氢放在高压修复之后滴加，烤片70度，烤2——3小时，其余步骤不变，请各位老师能否给一个标准的免疫组化步骤？