Ariel

我也正在做小鼠血管的石蜡切片,切片时蜡易碎,并且该有组织的地方都是空的,根本看不到血管.一开始怀疑是新蜡,后来反复熔了三次,再次包埋,还是不行!
  脱水时间如下: 70%酒精 24h    80%酒精24h    95%的 30分钟  95%的 30分钟  100%酒精 30分钟   100%酒精30分钟      100%酒精:二甲苯(1:1) 10分钟     二甲苯 20分钟     浸蜡1 10分钟   蜡二 20分钟
    包埋.      
       所有脱水都是手工做的.  请教本实验室的师兄们,他们没有遇到这样的事情!
   请高手指点! 我把所有的血管都包埋了,现在还有没有挽救的余地啊!
      否则,我死定了!

Ariel

肯请高手们指点啊!  都怪急死人了.......

Ariel

请问,我那已经包埋的血管是不是就不能再回头脱水和透明了.
因为我所有的小鼠血管都浸蜡包埋了,如果不能回头,我该怎么办啊?
   片子都切不出来,我还怎么做免疫组化啊?

Ariel

我的小鼠血管是取下后就直接固定的,管腔应该会塌陷的.同学说应该先灌流的, 先PBS再固定液灌流,效果会好些! 当时嫌灌流需耗时,费事,就没有做.
我想还是应该做的.
  现在我的片子切不出来,可能跟这个也有关系吧!

Ariel

取材之前灌流, 一般取胸主和腹主啊! 小鼠血管太小了,所以都要啊!我是研究动脉粥样硬化的,你的要看想观察的指标吧!