特殊染色整理
物质,特染方法,结果
结缔组织染色法
Mallory三色染色法:胶原和网状纤维蓝色,软骨、淀粉样变物质淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色,髓鞘和红细胞橘红色。
2.Masson三色染色法:胶原纤维绿色,肌纤维红色,红细胞橘红色。鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。
3.三联染色法:胶原纤维红色,网状纤维黑色,弹性纤维绿色,肌肉和红细胞淡黄色。
二.胶原纤维染色
1.Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法:胶原纤维鲜红色,肌纤维、细胞质和红细胞黄色,胞核蓝褐色。与胶原纤维染色相比的缺点是:易褪色和对比度差。
2.天狼星红(Sirius Red)苦味酸染色法:胶原纤维红色,细胞核绿色,其他黄色。在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。
三.网状纤维染色:包括:Gomori和James。
Gomori银氨染色法:网状纤维黑色,胶原纤维红色。鉴别诊断中的应用:1)癌和肉瘤的鉴别。2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。3)血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。4)黏液纤维瘤和黏液肉瘤。
四.弹性纤维染色:效果最好的固定液是:甲醛生理盐水。Gomori醛复红染色法:弹力纤维深紫色,黏液紫色(肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色),背景不同程度的黄色。1)配制后需在室温静置1-2日。2)是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。3)醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。3)可使胃主细胞着色。5)应放置在冰箱内保存。
五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法:维多利亚蓝+丽春红S:弹性纤维蓝绿色,胶原纤维红色,背景淡黄色。
六.横纹肌组织染色:Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH):胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色;胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。1)要在室温下成熟。2)可使用高锰酸钾促使PATH成熟。3)乙醇分化时要保存一定的红色。4)染色后用无水乙醇快速脱水,冷风稍干燥后封固。
七.糖类染色:过碘酸的作用是氧化。过碘酸-Schiff(PAS)染色法:糖原及其他PAS反应阳性物质红色,细胞核蓝色。注意事项:1)糖原固定必须及时。2)组织要取小块固定。3)Schiff液配好后,需放在棕色瓶内,冰箱保存。4)Schiff液使用时由冰箱取出需适应室温在进行染色。
八.黏液物质(黏多糖)染色:Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法:中性黏液物质(黏多糖)红色,酸性蓝色,混合性紫红色。中性黏多糖阳性的细胞有甲状腺滤泡上皮细胞、胃黏膜表面上皮细胞、结肠黏膜上皮细胞。
九.黑色素染色:
1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法: 黑色素及嗜银细胞颗粒黑色,胶原纤维红色,背景浅黄色。
2.Lillie亚铁染色法:黑色素暗绿色,背景浅绿或不着色,肌纤维和背景黄色。
十.含铁血黄素染色:
Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁:含铁血黄素蓝色,其他组织浅红色。1)组织固定不能使用酸性固定液。2)显示三价铁。3)器皿应洁净,操作中避免与铁接触。4)陈旧标本染色效果不好,必要时可用0.25%高门酸钾处理切片20-60min,再用草酸漂白。
胆色素染色:固定液:中性甲醛液、Bouin、Carnoy,避免使用Helly或Zenker等含铬固定液。三氯醋酸染色法:胆色素绿色,其他呈复染的红色和黄色。
纤维蛋白染色:血液中纤维蛋白原分子聚合而成的特殊蛋白质。
1.MSB染色法:纤维蛋白红色,陈旧性纤维蛋白紫色,细胞核蓝色,红细胞黄色。需注意的问题:1)苏木精染色的细胞核不能深。2)淀粉样物质可以结合偏光的方法得到良好的效果。3)观察时应结合HE切片。4)使用刚果红进行淀粉样物质染色在偏光显微镜下呈特征性的绿色双折光性。5)由于无水乙醇有脱色作用,脱水后即用冷风干燥,再透明封固。
2.Gram甲紫染色法:纤维蛋白蓝黑色,背景红色。
十二.淀粉样物质染色:
1.刚果红染色法:淀粉样物质红色,细胞核蓝色。
2.Jurgens甲紫染色法:淀粉样物质红色或紫红色,细胞核蓝色。
十三.真菌染色:
1.Crocott六胺银染色法:真菌黑褐色,细胞核红色,背景淡绿色。
2.高碘酸复红染色法:真菌紫红色,红细胞浅黄色。
十四.细菌染色:
1.Gram碱性复红结晶紫染色法:革兰阳性菌蓝色,阴性菌红色,细胞核红色。
2.Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法:抗酸杆菌红色,背景灰蓝色。最基本的染料是:碱性复红。
3.Warthin-starry胃幽门螺杆菌染色法:棕黑色或黑色,背景淡黄色。
十五.螺旋体染色:
1.Gimesa染色法:螺旋体及细菌蓝到淡紫色,细胞质蓝色,红细胞橘黄色。时间:8-18h或更长。
2.Ryu碳酸钠碱性复红法:螺旋体红色
十六.病毒包涵体染色:
Macchiavello包涵体染色法:包涵体红色,其余组织蓝色。疱疹病毒核内包涵体和麻疹病毒包涵体必须通过特殊染色方法才能证明。
十七.乙肝表面抗原染色:
1.Shikata地衣红染色法:HBsAg阳性棕色。地衣红PH:1.2-1.6.
2.醛复红改良染色法:HBsAg阳性紫色,结缔组织红色,红细胞及基质黄色。
3.维多利亚蓝染色法:HBsAg阳性蓝绿色,细胞核红色。1)需放置3周后使用。2)储存于暗处可反复使用。3)核固红染色液使用时不能摇动,用饱和上清液。4)初次染色,最好使用HBsAg阳性组织切片做对照。5)在维多利亚蓝染液中需放置12-24h。
十八.神经细胞尼氏小体染色:
1.焦油紫染色法:尼氏小体紫色,胶质细胞淡紫色,背景无色。
2.Einarson棓酸青蓝染色法:尼氏小体黑蓝-紫色,核蓝色,背景浅灰色。
3.甲苯胺蓝染色法:尼氏小体淡蓝色,细胞核深蓝色,背景无色。
十九.神经纤维染色
1.Holmes染色法:神经纤维黑色,背景灰紫色。
2.Bielschowsky染色法:神经纤维黑色,背景紫色。
3.Von Braunmubl神经纤维、扣结、老年斑染色法:神经纤维黑色,老年斑黑色,背景浅灰色。
4.Eagert退变神经纤维染色法:退变神经纤维黑色,背景浅棕色。
二十.神经髓鞘染色:
1.Weigert-Pal染色法:髓鞘黑蓝色,背景浅灰色。
2.Weil染色法:髓鞘蓝黑色,背景浅灰色。石蜡切片染色中最理想。
3.Kultshitzky染色法:髓鞘蓝黑色,背景浅黄色。
4.Luxol fast blue染色法:髓鞘蓝色,核仁紫色,尼氏小体紫色。
5.变色酸2R-亮绿染色法:髓鞘深红色,轴索和间质绿色,脱髓鞘纤维不着色。
6.Marchi退变髓鞘染色法:退变髓鞘黑色,背景浅棕色。
二一.神经胶质细胞染色:
1.Cajal星形细胞染色法:原浆性及纤维性星形细胞紫黑色。
2.改良的Cajal染色法:星形细胞黑紫色,背景粉红色。适用于石蜡切片星形细胞染色。
3.Weil及Davenport小胶质细胞及少突胶质细胞染色法:神经胶质细胞及少突胶质细胞黑色,背景黄棕色。
4.Nao menke及Feigin小胶质细胞石蜡切片染色法:小胶质细胞黑色,背景灰色。
二二.神经内分泌细胞亲银反应:
1.Lillie-Masson二胺银法:亲银颗粒细胞黑色,细胞核红色,背景浅灰黄色。
2.Gomori-Burtner六胺银法:亲银颗粒细胞黑色,背景浅灰红色。
二三.神经内分泌细胞嗜银反应:
1.De Grandi改良硝酸盐反应法:嗜银细胞颗粒棕黑色,细胞核红色。
2.碱性重氮反应法:嗜银细胞颗粒橘红色至红色,细胞核蓝色,胞质黄色。部位:小肠和类癌。
二四.嗜铬细胞染色
1.Gimesa改良染色法:嗜铬细胞红色至紫红色,皮质细胞蓝色,红细胞粉红色。
2.Wiesel染色法:嗜铬细胞黄绿色,细胞核红色,其他均蓝色。
二五.肥大细胞染色:
甲苯胺蓝改良染色法 :肥大细胞颗粒红紫色,细胞核蓝色。
醛复红法:固定:甲醛生理盐水。