小小病理技术员

前几天我配置了一次harris苏木素：（进口分装)苏木精3克，无水乙醇30毫升，钾明矾60克，蒸馏水600毫升，**氧化汞1.5克，以上材料是摘抄他院的配方。
配置过程是吧苏木精溶解在20毫升的无水乙醇里，加盖，留了10毫升，把钾明矾放入蒸馏水加热溶解并沸腾了，移开火加入了苏木精并把剩余的10毫升无水酒精刷了下瓶子，就为了充分的利用苏木精，加入了苏木精后变成深紫色，继续加热，很快沸腾了，再次移开了火，加入了**氧化汞（可是因为我动作太快和烧瓶太短，喷出来了，吓死我啦，其实我原来都是用大烧瓶配苏木素的，可是这次我想偷懒，于是就出现了那个吓人的一幕。）我觉得之前的喷可能氧化汞不够所以加了少量的氧化汞，这是已经平静了把它们搅拌了一会就放在冷水里去了（因为摘抄的配方注明加了氧化汞后不要加热，只用搅拌溶解就够了。）然后冰水一夜，第二天过滤后（沉淀好少啊）加30毫升的冰乙酸，就开始用了，染了10分钟，结果效果很不好，虽然蓝的很明亮，但是颜色很浅，前辈们加**氧化汞后到底需要加热吗？我配置的苏木素肉眼看总是深酒红色每次配的苏木素效果都不好，每次配苏木素都很头疼啊。

[ 本帖最后由 小小病理技术员 于 2010-6-8 19:06 编辑 ]

6504339

加如 氧化汞后，一般煮沸2分钟，放入冰水中 快速冷却！不 要用 冷水，要 用冰水！Hgo加慢点，一点一 点加，别那么急，没这次没 爆炸算你运气好！那条件就别 配harris，Hgo有毒！建议你还是 配GILL安全又方便！

[ 本帖最后由 6504339 于 2010-6-8 20:22 编辑 ]

小小病理技术员

那GILL苏木素效果怎么样呢，我们科好象没有碘酸纳。而且自打我来到病理科一直就是用HARRI苏木素。

6504339

效果还可以，刚配的的核可能偏紫，所以一般是配好后放一周使用！

iamyueyueyue

王华

可能是没真正掌握好苏木素配制的原理吧，很多人配苏木素染液都在潜意识里害怕氧化不足，所以氧化剂的量都用得偏多，导致苏木色精氧化过度产生过多的二级氧化物，苏木色精的一级氧化物（苏木红）才具有染色能力，进一步氧化形成的二级氧化物因为共轭体系中的助色基团受到氧化，导致染色能力丧失了。
    所以配制苏木素染液的时候，无论使用什么氧化剂，都要掌握一个原则：宁愿氧化不足，切勿氧化过度。
    氧化不足的染液在使用的过程中可以继续氧化，理由有二：1、化学反应是一个平衡体系，在反应平衡时反应式左侧的成分还有一定的量，在使用的过程中，因为反应右侧的反应产物（苏木精）浓度下降，引起反应右移，溶液中未反应的氧化剂与苏木色精继续氧化产生苏木红。2、我们使用的自来水是用氯气消毒的，自来水中用一定浓度的次氯酸（强氧化剂），染片时带入的自来水还可以继续氧化苏木色精的。如果氧化过度就没有“回天之力”啦！
以下提供氧化汞氧化苏木色精的反应方程式：
          C16H14O6 + HgO → C16H12O6 + Hg↓+ H2O
摩尔质量   302.28       216.61
质量        1g             0.72g
      由此可以看出氧化1克苏木色精在理论上需要0.72克氧化汞。但在实践中由一个问题不能忽视：我们的苏木色精粉剂的纯度不能达到100%的，所以氧化剂的量要减少，我的经验是只用60%的量。氧化3克苏木色精只能用1.2克氧化汞。配出的染液不但染色快，还很耐用。
     根据你所说的情况（本来氧化汞的量就偏多了，过后还补了一点），苏木素肯定是氧化过度了。氧化过度的苏木素呈葡萄酒的颜色，而且一点沉淀都没有，染色力急剧下降，染很久都不上色，染液也非常不耐用。
     减少氧化剂再试试吧！你的步骤没什么问题，就是要注意一定要等液面平静时加氧化汞，加入后再煮3分钟，一定要不停搅拌！
     建议：因为氧化汞有毒，用氧化汞配苏木素染液一定要过滤才能使用，很麻烦。还是改用碘酸钠配苏木素吧，安全、简单、快捷，如果苏木色精和酶染剂质量好，连过滤一步都可以省啦！没有过滤一步你会觉得很省心的！

[ 本帖最后由 王华 于 2011-5-29 14:40 编辑 ]

akueer

引用:

原帖由 6504339 于 2010-6-8 20:17 发表
加如 氧化汞后，一般煮沸2分钟，放入冰水中 快速冷却！不 要用 冷水，要 用冰水！Hgo加慢点，一点一 点加，别那么急，没这次没 爆炸算你运气好！那条件就别 配harris，Hgo有毒！建议你还是 配GILL安全又方便！

有毒？？你说的是那难闻的气味吗？？

ilen

HgO是有毒的，必须戴手套哦，致癌的，

ilen

我想向各位老师请教下，
我科室以前是用harris苏木素，即苏木素1g，无水酒精10ml，硫酸铝钾20g，蒸馏水200ml和氧化汞0.5g，

方法不错，但不知道是不是药品本身的问题，效果没有刚进单位时的好，以前可以用两个月的，现在只能用一个月就得更换，

还有可能我比较少配置，现在仍没有很好的掌握火候，常常在放入氧化汞后等到试剂变深蓝色，用玻棒于纸张中试过够蓝才敢停火冷水冷却，这样就导致试剂可以用但是过氧化了，寿命不长久，别人配置的可以用一个多月，我的就只能勉勉强强一个月，有时候甚至不上色，明显过氧化了；但这个方法沉淀少，我们科基本等杂质沉淀，不过滤就直接用了，小心点，没有任何问题，配制步骤方便，少了过滤；
后来我去上级医院学习回来，用那边医院的配方，

就是苏木素1g，无水酒精10ml，硫酸铝钾20g。蒸馏水100ml和氧化汞0.25g，冰醋酸5ml；

这个方法比原来的方法容易配置，我也配置了两次，就这这个方法必须要过滤，还有就是火候问题，

第一次有老技术员在旁边帮忙， 加入氧化汞后上火沸腾，试剂从紫红色变成了蓝色，用纸张试过，颜色很深，然后停火冷水冷却，摇晃瓶壁可以看到沉淀产生了，试剂也很黏瓶壁，可以认定一定能上色，第二天在试剂上见到了氧化膜，试剂也从蓝色变回了紫红色，沉淀很多，过滤后染片颜色不错，但是我们也只是坚持了一个月，之后再想加冰醋酸也没有用了；但上色快，我们这50秒颜色就很深了；

第二次我是自己配置的，同时方法，但是在加入氧化汞后搅拌沸腾，试剂都是紫红色的，没有变成蓝色过，并且用纸试颜色也不深，还是煮了1min才好点，然后停火冷水冷却，

摇晃瓶壁，试剂无法粘附瓶壁，据说这样可能会使组织无法上色，或易脱色，也基本没有什么沉淀，然后第二天要过滤了，再看，没有出现氧化膜，有沉淀，但比第一次的少，试剂仍是无法粘附瓶壁，沉淀呈现透明大颗粒结晶状，感觉和第一次出现的沉淀不大一样，当时我没注意到，失误了，

现在我把第二次的试剂用于冰冻染色，颜色上色不错，但感觉没有第一次配制的容易上色，基本需要1分钟时间，但也没有脱色现象！！问过看片医生都说还可以！

注：1。上面两种方法我都没有放入冰醋酸，我们科认为冰醋酸对保存片子不利，容易使片子褪色，所以基本上是能不用就不用！！

2。配制时我们都是用透明三角玻璃瓶，这样对颜色变化，试剂是否溶解充分能明确的观察到！！

    我想请问各位老师，我的两次配制方法，有哪些不足，还有火候方面，我实在是搞不懂，到底到什么程度最好，从颜色可以判断出来吗？特别是就换了个人控制火候，产生的可见效果就相差这么大，我的两次配制，哪种的火候更好，或是是不是都已经过氧化了，我最怕过氧化了，用我们科室以前的方法就是容易过氧化造成失败@@

还有一点，学习配制这个试剂时我特地问过老师，他说应该一沸腾就停火冷却，当时不知道效果，后来配制时发现，若是这样，用纸试验，试剂颜色很淡，没有达到深蓝色的染色要求，所以之后又继续煮沸到用纸可以看出试剂变成深蓝色才敢停火冷水冷却，不知道是不是已经过氧化了！！

请老师帮我点评一下，谢谢！！

xyk666

建议你可以去北京世济合力生物科技公司的网站www.shijiheli.com.cn上看看他们的苏木色精-伊红染色试剂盒，换用一下这个试剂盒试试吧