sprac

皱褶很小，在显微镜下才能够看到，酒精展片等等方法都用了，没啥效果。同一批也有好的，但就这个，表面看不出来，却怎么也切不好。

不知道问题出在哪儿，

sprac

还有啥办法呢

sprac

展片温度都到了50度了，大的皱褶没有，都是这种小的，

kelvindylie

某些蜡块确实很难切，我一般都是从刀片入手，遇到这样比较难切的蜡块就等换新刀片的时候切它，力道要慢而轻，连续切片估计很难有好的效果，只能切一张展一张，耐心一点应该可以的。

ChenRong

第一张像非洲地图，第三张像卫星地图，你厉害的。


第一张看明白了，
1，保证固定和脱水没问题的前提下，问题出在你的切片手法上
2，对自己手法有信心的话，问题在于水温上，过高，来不及展片。
如果是水温的问题，你试试捞免疫组化常用的方法，先在冷水里漂开在放到热水里，这样还不行的话，还是你切片不好。（绕圈子）。
第三张，似乎看得问题和第一张有所不同，最好先染好色的照片上传上来大家再分析。（有点像水温的关系没展开），看图在说。

dingwei

这和组织类型和脱水有关系。
组织与蜡的收缩度不一样，一般是组织收缩小，蜡收缩大引起，原因是脱水时间不够。
解决办法只有在46-47度水中长时间飘着，边上蜡都化了也没关系，只有等全部平整了才能捞起来。

sprac

感谢2位老师，
前面组织处理应该有问题，但这个组织本身不大，小鼠的胰腺，蜡块看上去问题不大，但切成蜡片组织感觉碎裂了，冰箱冷冻，切片时哈气，30%酒精预先展片。都试过了，长时间的浸泡也尝试了，不能解决问题。
丁老师说是脱水不够，我有点担心脱水或二甲苯过度，但记得无水酒精和二甲苯应该都是室温小于1小时的。

sprac

仔细看了一下，估计这种看上去是褶皱的其实是组织碎裂形成的，估计不可能展的开了，只有在切片上下功夫了。

sprac

请大家再帮忙分析一下，还有啥补救的方法，脱水，透明到底有啥问题。

dingwei

脆裂和是皱处理方法是不一样的。
裂去除的办法：1、用5%氨水涂在蜡块切面上切。   
                             2、组织不要过冰。                        
                              3、刀要快，片子要薄。