一张HE切片简单,,但又是最难的 ,简单是好做,,困难的是怎么才能做出一张漂亮的切片,这个没有标准也没有共识!! 写一下自己的愚见及感受!! 固定是第一步很重要,固定不充分后面的免谈,中性福尔马林固定最好,但这个不能强求,,呵呵因为我们没做到,固定在24小时以内目前发现影响不是很大,, 脱水从75%酒精低浓度慢脱水,我们的机器在第一缸是固定液,我在其内加了酒精感觉比单纯的固定效果好,,切片时感觉很明显!
浸蜡3道在4-5小时,不低于4小时(大组织),,蜡固定时间更换,长时间其内二甲苯太多严重影响浸蜡!组织发软,入水即散! 染色脱蜡时间充分在脱蜡二甲苯之后的纯酒精时间一定要充分,苏木素我们用的是自然氧化的,,这个必须是长时间充分氧化好的才能用(Harris的也很好,配时硫酸铝钾和氧化汞均减至少1\3的量,冰醋酸少加),,,苏木素染色时间和分化时间根据试剂情况,,我们是用热水蓝化,,时间不要太长,,长了会呈灰色不亮。伊红是酸化伊红,,染时时间要恰到好处,潜了太淡,,深了整个组织间隙以及胞核都受影响。太红影响视野!! 封片不可太干,也不要太湿,组织呈湿润状态最好!! 请指教!!!