食管组织石蜡切片问题
新手,最近做食管组织的石蜡切片,遇到些问题,想请各位老师解答,谢谢!(1)食管组织固定是需要保持官腔结构么,能否纵行剖开再固定
(2)石蜡切片机切片时经常切不到完整组织,
(3)展片时组织破碎,捞不到完整组织
(4)封片时有气泡
(5)封片后光镜下观察,未见组织结构或未见正常组织结构紊乱,
附石蜡切片过程:4%中性甲醛固定18h+——90%乙醇脱水2h——95% 2h,——95% 过夜,——100% 1h,——100% 1h,——二甲苯i 1h,——二甲苯II 1h,——液蜡I 1h,——液蜡II 1h,——,包埋,切片,——42度水中展片——60度烤箱烘干2h,——二甲苯I 8min——二甲苯II 8min——100%乙醇 6min,——95%乙醇 6min,——90%乙醇 6min,——80%乙醇 6min,——过清水,——苏木素5min,——过清水,盐酸酒精1min,——过清水,——氨水返蓝,——过清水,——伊红刷下,——过清水,——80%1min,——90%1min,——95%2min,——95%2min,——100%4min,——100%4min,二甲苯I 6min——二甲苯II10min——中性树胶封片