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细胞离心涂片机在宫颈薄层细胞涂片中的应用
无锡市妇幼保健院  陈萍倩 赵华 张蓉 陆敏华 印永祥
  
   传统的宫颈涂片用刮匙绕宫颈一圈取样直接涂片，是施行多年的简便、易行的宫颈癌检查方法。由于种种原因，涂片常常会出现不均匀。过厚、过多的粘液，血液炎症细胞使上皮细胞被遮盖；涂片时用力过猛使细胞变形；加上固定等方面的原因造成细胞结构不清，都会给诊断带来困难，甚至产生假阴性等。
薄层细胞涂片给细胞学诊断带来新的突破。涂片基本为一层细胞，镜下几乎每个细胞清晰可见，易于分析、鉴别。由于薄层细胞采用湿固定，大大提高了细胞核结构的清晰度。一张满意的涂片，更有利于诊断，减少误诊，提高阳性率。
去年以来，我院选用了Cytospin4细胞离心涂片机，将液基式样本制成薄层细胞涂片，至今已开工展了6000余例，取得了良好的效果，现介绍如下：
1. 细胞自动离心机制片操作过程。
1.1 Cytospin 4细胞机及附件：
Cytospin 4细胞机为英国山顿公司生产。密封离心头有12个样本室（离心头可高温消毒）。随机配有12个样本夹，单孔离心漏斗、双孔离心漏斗，大号离心漏斗及相配套的滤片供你选用。漏斗，滤片经消毒处理可复用。因宫颈涂片细胞量大，本院选用大号离心漏斗，一次可处理12个样本，涂片范围294平方毫米
1.2细胞自动离心机制片过程及原理：
细胞离心机内置一只可高速旋转的密封盘，叫做密封离心头。离心头内有十二个穴腔，叫做样本室。样本夹将载玻片紧夹在衬有过滤片的离心漏斗平面，嵌于样本室的导槽内。样本液注入固定好的离心漏斗喇叭口内。通过旋转产生的离心力，将悬浮在样本液中的细胞分离并沉积在载玻片上，样本液的液体则被过滤片吸收。载玻片上形成一形态完好，单层平铺的细胞。
1.3宫颈液基样本的取材
取一次性带盖塑料薄膜状标本杯，盛放5ml左右生理盐水，用宫颈刮匙或一次性宫颈刷，收集宫颈外口及颈管内移行环处脱落的细胞。将收集的细胞洗入盛有生理盐水的标本杯内，连同申请单送交病理科，标本不要过夜，夏天最好4小时内制成薄层细胞涂片固定。
1.4病理科接标本后，将申请单及标本编号标记，然后将标本倒入夹有（对应编号）玻片的漏斗内，一般取样＜5ml，装入离心头的样本室内（注意对称，平衡）。盖紧离心头盖，放入离心机，并检查正常锁定机盖后，选择程序，开始离心。用速度控制键控制离心机转数，范围200～2000转/；用高、中、低档加速控制键控制速度变化率；运行时间可从1分钟到99分钟，并可设置23个程序供选用。本院常规使用高档加速1500转/分/5分钟。离心完毕，取下玻片，立即固定于95%酒精内。清洗样本夹，漏斗和滤片浸泡在高效氯消毒液内，次日清洗烘干备用。离心机用消毒液擦洗，再用干毛巾擦净备用。
1.5 涂片在95%酒精中固定15分钟左右后作巴氏改良染色、脱水、透明、封固。固定液定期更换保持浓度。
2.Cytospin 4 细胞离心涂片机操作注意事项：
2.1 加入的漏斗内的液基样本量＜5ml。应尽量避免粘液倒入漏斗杯内（因漏斗杯内粘液在高速离心时易贴到玻片上，影响细胞的贴附）。按装漏斗杯注意对称、平衡。
2.2漏斗杯的装取均应在机外进行，因离心机中央的装置较精细、灵敏，在机内操作，易影响平衡，产生故障。
2.3漏斗内液基样本量较多时，滤片不能吸尽，会甩入离心头。应清除后进行下一次操作，否则影响平衡。离心头的密封圈一定要放正，如果未正确放置，离心时液体极易从离心头内甩出，进入离心机，要及时擦干离心机内的液体，否则液体进入马达，引起马达生锈，导致故障。离心机每天使用结束后，要做好清洗，消毒，保养工作。
3.其它注意事项
3.1 严格做好标本、申请单的查对、编号工作，杜绝标本错位等。
3.2 因细胞保存液价格昂贵，成本高。本院经反复实验，使用0.9%生理盐水（接近人体液）替代细胞保存液效果良好。但生理盐水无固定作用，能维持数小时，环境温度较高时，细胞会产生轻度自溶。因此，夏天取样后，应在较短时间内制成片，立即固定。如有困难，标本要放至4度冰箱内冷藏，但不能过夜。
3.3操作人员要做好自我防护，因液基样本内常有许多病菌等，要戴好手套，注意防护消毒。
3.4 临床取样是做好离心涂片的关键。临床医生在取样时如发现病人有颈粘液、血液较多时，要用干棉球轻擦后再取样，以防标本内混入粘液、血液影响涂片质量。有条件的单位，可将该类标本采用新柏氏TOT，或Thinpre 2000系统和程序化处理，将粘液、血液、炎症细胞分离出来，再经高密度滤器过滤后转移到载玻片上。如不采取措施或注意取样，此类涂片往往是不合格涂片，不满意涂片无法反映患者的真实情况。还有，临床医生取样过少，涂片内细胞屈指可数，同样也是不合格标本。
    细胞离心涂片机做各种体液标本效果更好，细胞均匀集中平铺，便于诊断。但对于较厚的液体，含血液多的体液不适宜做，要作处理后再离心，否则涂片很厚，无法看清，诊断。

奇刺

请问FAL老师，这种设备可以拿来做硅藻么？

fal

对不起，由于有点特殊的事件，很久没有上网了。
不知道硅藻做什么？能否说得具体一点？

merry70

fal 老师，我从事宫颈脱落细胞检查已经有几年时间了。我很希望能够与你切磋这方面的经验及教训。

fal

欢迎一起交流。

relaxdy

请问一下你们用的巴氏改良染液的配方

erhu910324bl

请问Cytospin 4 细胞离心涂片机在那里可以买到？其价格如何？

ChenRong

这个方法对于专科医院或搞研究的比较好,因有一些因素要影响,如价格成本贵,速度慢,要有临床医师的配合.
另外请问下:"将该类标本采用新柏氏TOT，或Thinpre 2000系统和程序化处理"是怎样的,讲讲. :em14:  :em14:

rich1856

国内同类替代品太多了,效果却不是那么满意!

wzqyqp

fal老师恐怕现在科室里不会再用这种方法涂片了吧？不过我很感兴趣，不知这Cytospin4 细胞离心涂片机的价格如何？最近科室在做LPT这种，感觉试剂太贵，纯粹是为厂家打工，郁闷……