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请教热水返蓝的利弊

请教热水返蓝的利弊

今天用热水返蓝的时候,因为手头还有别的事,居然忘记关水龙头,70度左右的热水一直流了大约三四分钟,发现后立马将热水换成冷水,又冲了大概一分钟,这才发现片子很蓝,迅速分化,再返蓝,有所改观。照说对片子多少总有些影响,比如说细胞膨大;要是没有再次分化、返蓝,而是换成冷水后直接就过伊红,片子会不会红蓝不均?热水返蓝毕竟有它的局限性,比如时间长(尤其对于冰冻快速标本来说),但同时也降低了成本,至于碳酸锂和氨水没试过,效果如何?望朋友们指点!

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热水返蓝是一个很好的方法,热水返蓝速度很快,所以,经热水返蓝后,还要经过一段时间流水冲洗,把切片上残留的酸彻底冲干净,以利于切片长期保存不褪色。
冰冻切片热水(水温只要60度左右就可以了)返蓝速度也很快阿,只要5-10秒就可以了,怎么会很长呢?用热水近蓝后染依红时间很短,只要1-2一秒即可,而用氨水返蓝,不仅需要长时间把氨水冲干净,而且染依红时间也较长。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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也许是习惯所致,我们一直用的是热水返蓝。常规制片分化后冷水冲洗5-10秒,尔后换60度左右热水中蓝化1分钟,再用冷水缓慢冲洗2分钟;冰冻切片和丁老师说的差不多,但我们都习惯热水出来后再进冷水冲洗片刻。看来在保证将酸冲洗干净的前提下,返蓝时间还可以缩短!氨水不行,那碳酸锂效果如何呢?

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氨水和碳酸锂都是碱性液体,其原理是一样的。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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看来还是用热水比较好,谢谢丁老师指教!

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引用:
原帖由 dingwei 于 2010-7-7 17:02 发表
热水返蓝是一个很好的方法,热水返蓝速度很快,所以,经热水返蓝后,还要经过一段时间流水冲洗,把切片上残留的酸彻底冲干净,以利于切片长期保存不褪色。
冰冻切片热水(水温只要60度左右就可以了)返蓝速度也很快 ...

请教丁老师,为什么用热水冲会有酸残留呢?

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引用:
原帖由 yangpntz 于 2010-7-13 21:54 发表

请教丁老师,为什么用热水冲会有酸残留呢?
用流水将之前分化用的盐酸冲走,和水的温度无关

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回复7#

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引用:
原帖由 又红又亮 于 2010-7-13 22:08 发表
用流水将之前分化用的盐酸冲走,和水的温度无关
我们都是用不分化的,所以不存在酸不酸的,还以为热水冲了会变酸,所以才会有这样的疑问,见笑了。

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引用:
原帖由 yangpntz 于 2010-7-14 20:08 发表

我们都是用不分化的,所以不存在酸不酸的,还以为热水冲了会变酸,所以才会有这样的疑问,见笑了。
不分化,核和浆不都成蓝蓝的,怎么看?

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