Howell’s 红氨酸染色法 用于铜沉积物染色
试剂配制:
1. 0.1% 伊红Y-乙醇液。
2. 10%醋酸钠水溶液。
3. 红氨酸贮存液
红氨酸 50mg
无水乙醇 50ml
4. 红氨酸工作液
红氨酸贮存液 2.5ml
10%醋酸钠水溶液 50ml
固定:10%中性缓冲福尔马林或其它固定液
切片:石蜡切片5微米
染色步骤
1. 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2. 红氨酸工作液37℃过夜。
3. 70%乙醇15分钟。
4. 无水乙醇6小时。
5. 对比染色,淡染醇溶性伊红。
6. 水洗,无水乙醇脱水。
7. 二甲苯透明,中性树胶封固。
结果
铜-绿色
黑色素颗粒,细胞质-粉红。
说明:
1. 设阴性和阳性两方面对照进行染色控制。染色时偶尔会失败,阳性对照利用已知有肝豆状核变性(Wilson’s病)的肝脏切片比较合适,如果作不到着一点,铜 染色可能会在慢性活动性肝炎中出现。
2. 铜与红氨酸形成螯合物,和其它一些金属也能形成螯合物。其中钴,镍可以和铜混淆。因此加入醋酸钠能够阻断它们。
3. 红氨酸也称为二硫代乙二酰胺;乙二硫二胺或二硫代草酰胺。
这个方可以。
[ 本帖最后由 ylzhao 于 2011-10-5 19:43 编辑 ]