与丁伟老师谈谈全国冰冻切片比赛的一些小感想
我是个不太喜欢上网的人,主要是要干的活很多,要学的东西也很多,所以上网都是下班后在科室上,下班回到家就安心的看书,我家没装电视没装网线(自己自制力不够好,为了减少**,只能出此下策啦!),科室的研究生给我起了一个绰号“文明原始人”,呵呵.....
周六来科室值班就上网看看,看到丁老师关于全国冰冻切片比赛的帖子,有些小感想,就和丁老师好好聊聊啦!我的一些观点不是很成熟,丁老师别取笑哦!
丁老师真是“火眼金睛”啊!比赛时,为了快速冷冻组织、利于切片,我的组织的确是在冷冻的过程中翻转过来压了一下。丁老师说的风险的确存在,不过只要掌握好时机也能确保无虞。我的小“伎俩”是:组织托放在冻台上预冻后先加一小层胶,待胶的下1/3变白时将组织放上(放上之前组织要用滤纸吸干游离的水分,很重要),在组织周围再补一些胶,等胶与组织的下2/3变白但表面尚透明时及时将托翻转5秒后再正转过来,翻转时不能用力压,要保持组织的自然结构。经过这样处理,组织冷得快,翻转时也不会有掉下来的危险!丁老师说我的组织很大,呈圆形可能是压出来的,其实也不算是啦!我得到的那块肝组织的确是超级大,估计是不是我最后一个操作,取材的老师额外的照顾我啦?!
因为比赛时冰冻切片机的温度是不能随意调节的,为了切好肝组织,我的切片顺序是肝—肾—肠,在肝组织没完全冻透时就开始粗刨,待到切片时肝组织的温度还不是太低,所以切片很顺利。如果组织太冷,用手去捂,可以解决裂纹的问题但组织在一冷一热的作用下,细微的组织结构会受到很大影响!
关于组织掉片的问题,我平时做冰冻切片时软组织从来不会出现掉片的,但在比赛时其中一片肝组织切片居然掉了4/5,还好另一张只有轻微的掉片,真是万幸啊!个人分析原因:玻片表面不够光洁。这样说话,估计玻片供应商可能会很有意见。声明:仅为个人意见哦!
冰冻切片比赛中一个很重要的问题:选手们选用的冰冻固定剂是影响切片染色质量的重要制约原因。冰冻固定液需要改良啦!我在比赛时使用的是改良型Bouin固定液(我科平时也用该固定液,比赛前我们要求大会提前配好的)。固定液直接影响切片染色的好坏,当然规范的操作也很重要,但固定液不理想,切得再好也染不出好效果的!改良型Bouin固定液(苦味酸75%酒精饱和液75ml,甲醛溶液10ml,丙酮10ml,冰醋酸5ml,醋酸钠1克混合)。
这反映出目前我们病理技术需要解决的问题:加强基础知识的再学习!什么是病理技术的基础知识?是各种有关病理技术的专业书籍吗?远远不够!是基础化学,基础有机化学,染料化学、生物化学,分子生物学,病理学、组织学、甚至包括量子物理学和哲学等等!医学版的基础化学、基础有机化学是不够用的,要好好看看理工科版本的化学教科书。我们在本科学过的化学知识基本上都还给老师啦!病理技术工作者没有坚实的理论基础如何形成发散性思维?如何有创新性灵感?如何形成精准的直觉?再学习不光是为了巩固基础理论,更重要的是要跟上科技发展的步伐,让相关学科的先进知识能与病理技术产生新的“交汇点”,加快病理技术的发展。病理技术工作者不光要善于观察眼睛看的到的事物,更重要的是要能体会眼睛看不到的东西!病理技术工作任重而道远啊!呵呵......这是我对病理技术“理论架构”的个人理解,您别取笑哦!
对丁老师发的几张照片的一些个人见解:
冰脆1:肝细胞核中间,胞浆出现空泡样间隙,估计是组织冻得太冷,切片时用手捂过切下的第一张切片。一冷一热就造成了细胞结构的改变。丁老师说的改变冷冻温度是最好的方法!但如果不能改变温度的情况下,用手捂过之后,弃去3~5张切片再贴片可以改善此类状况。
冰晶多(细胞间):个人认为那不是冰晶,而是使用了AFA或AF固定液或其他的脱水效果强大的固定液而导致的肝细胞收缩,肝索脱水变细导致肝窦增宽。
我们对经常使用的“冰晶”一词会不会是有所误解呢?
我还是一个刚刚上路的新手,以上只是我的一些小小见解,说的不对请丁老师多多包涵啊!