转：不同的温度在病理切片制作中的影响
作者：张同海，樊克武 ［摘要］ 目的：应用合适的温度制作病理切片。方法：组织取材，常规处理后，用几种不同温度冷冻组织块后进行切片，染色后镜下观察。结果：几种不同温度下制作的切片效果有极大的差异。结论：要制作优良的病理切片必须应用适当的温度。
［关键词］ 组织；温度；切片
Influence of Different Temperatures on the Cutting of Tissues
ZHANG Tonghai,FAN Kewu
(Affiliated Medical University of Nanjing First Hospital, Nanjing,Jiangsu 210006，China)
Abstract：Objective Adopting appropriate temperature to cut tissues.Methods After thegross of tissues,process tissues in a routine way,then cut tissues in different temperatures and check them in microscope.Results The effect of the ** of tissue sections is great different at the methods of different temperatures.Conclusion An excellent ** of tissue section must use appropriate temperture．Key words：Tissue；Temperature；Section
在临床病理检验工作中，石蜡切片的制备技术是一项重要的常规技术，一张切片质量的好坏直接关系到对疾病的诊断。在制作病理切片的过程中，各种因素都会对切片质量产生影响。因此，要制作一张优良的切片，必须要考虑多方面的因素，其中温度的影响是我们经常忽略的一点，然而在制作石蜡切片中温度的影响却十分大，因此，我们在这一方面做了一些探讨。
1 材料与方法
1．1 材料
手术切除标本100份，其中包括脂肪组织、宫内膜、甲状腺、胃肠等不同类组织。
1．2 仪器设备
中威BMJiii型病理组织包埋冷冻台，此包埋冷冻台不可调节冷冻温度，开机一段时间后，其冷冻温度可达到-33 ℃，因此我们置一温度计于冷冻台面测量台面蜡块的温度，并通过开、关电源，用不同的通电时间来控制冷冻温度。
1．3 方法
各类标本取材后，脱水，包埋，包埋好的蜡块置于包埋冷冻台上冷冻。在蜡块冷冻到-5 ℃时进行切片。把切过的蜡块继续冷冻，直至蜡块的温度到达-10 ℃时再次切片。再次把切过的蜡块置于冷冻台上冷冻，然后在蜡块的温度处于-15 ℃时进行切片。把不同温度下制成的切片染色观察。
2 结果
二种不同温度下制成的切片效果如下：在蜡块处于-5 ℃时切片的效果不甚满意，尤其是纤维组织多而致密者或富含脂肪组织者，此时温度下的蜡块的硬度不够，无法切出完整的切片或是切出的切片出现皱折。在蜡块温度处于-10 ℃时，对大多数标本来说，切片的效果较为满意，此时的蜡块的硬度适宜，容易切出满意的切片，但是对于含脂肪组织较多的组织，有时仍难以切出满意的切片。在蜡块温度处于-15 ℃时，蜡块变硬易碎，无法切出完整的切片，特别对于含纤维组织较少者，如宫内膜组织，前列腺组织等，切出的切片在镜下观察有裂隙现象，但对于含脂肪组织较多的标本，此时的温度下切片效果较好。
3 讨论
在切片过程中，我们经常发现有些标本无法切出令人满意的切片，以前我们经常把这种情况归咎于标本的固定、脱水，切片刀等方面的原因。的确，标本的固定、脱水直接关系到切片的好坏，这是我们在工作中要注意的方面。在我们此次试验过程中，因为我们对所取标本采用同一前期处理，所以我们在此不考虑标本在固定、脱水方面的影响。通过对上述几种温度下进行切片的比较，我们看出，温度对切片的影响确实存在，并且直接关系到切片的质量，这是我们以前忽略的方面，也未见过此方面的完整技术报道，相关的文献中只是要求使用冰块对组织蜡块冷冻，以利于切片［1］。对于不同的温度对于切片的影响，我们考虑如下：不同的标本，其组织结构、成分不同，其物理性状也不同，因此在不同的温度下，不同组织的硬度及韧性也不同。因此我们在切片时，不能一概而论对所有的组织采用同一的冷冻温度，应区别对待不同的标本。只有采用合适的温度对待不同的标本，才能制出优良的切片。通过对上述几种温度下进行切片的比较，我们发现，一些结构疏松，含纤维组织，脂肪组织少的组织，如血块、宫腔内组织，前列腺组织，此类组织韧性小，在过低温度下容易变脆，所以冷冻温度应高一些，大概-10 ℃左右，只要蜡块达到一定的硬度，能切出切片即可，如果温度太低，常导致组织变硬，易碎，镜下产生裂隙。而一些富含纤维、脂肪的组织，如胃肠组织、乳腺组织，则韧性较大，在温度较高的情况下，切片效果不好，常无法切出完整的切片，但在温度较低的情况下，组织并不容易变脆，所以对于这类标本，蜡块的温度则要求尽量低一些，约-15 ℃左右，保证足够的硬度，才能切出满意的切片。在实际操作过程中，冷冻不足可继续冷冻，如果冷冻过度，组织变脆，切片呈碎屑状，可以用手压住蜡块表面2 s~3 s，蜡块表面温度可迅速升高，仍可切出满意的切片。另外需要说明的是，在我们此次试验中所使用的标本冷冻台所显示的温度，经我们测量，并不等同于蜡块实际的温度。因此在实际操作过程中不可完全依据冷冻台所显示的温度，应依据室温变化，开机时间长短，掌握合适的台面蜡块温度。我们此次试验只是对温度在切片中的影响做一探讨，在实际操作过程中，此方法在工作量大的病理科难以开展，所以我们推荐应用温度可调控型冷冻台(目前已有厂家生产)，并且其控制面板温度与冷台台面实际温度相差不大，这样该方法才有实际应用价值，特别是在外检工作量较大的病理科。
参考文献：
［1］上海第一医学院病理解剖教研组．病理检验技术［M］．上海：上海科学技术出版社，1978，1：211．
南京医科大学附属南京第一医院，江苏 南京 210006
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