Taurus

我正在做小鼠脾的病理切片，但是脱水之后组织发黑，过硬，包埋后无法正常切片，换过很多时间参数，但效果还是不理想。
不知道大家有没有适用于脾的各步骤的时间参数呢？万分感谢~

江南

70酒精  8小时
80酒精  4-6小时
90酒精  1-2小时
95酒精（1）  15-30分钟
95酒精（2）  15-30分钟
二甲苯（1）   5-10分钟
二甲苯（2）   5-10分钟
蜡1               1小时
蜡2               45分钟
蜡3               45分钟
必要的时候可以从50的酒精开始。当到了95的酒精脱水的时候可以隔5到10分钟打开包埋盒用大头针检查组织的硬度，随时调整脱水时间

colin

引用:

原帖由 little 于 2007-3-14 10:40 发表
我也正在做，非常苦恼。切片的时候很脆，很难才能有一片，镜检还是不完整的。脱水时间如下：
70酒精  3小时
80酒精  1.5小时
90酒精  1-2小时
95酒精（1） 60分钟
95酒精（2）  60分钟
二甲苯（1）   60分钟 ...

首先在这发表一下个人意见就是你的脱水问题比较的大.1、没有经过无水肯定的脱水不净（虽然脾比较易脆）。2、就是二甲苯可以加一缸，组织透明一定要够要不到时候镜下看上去不清晰而且在切片的时候也不怎么好切总是感觉组织有点韧！还有就是在低浓度酒精中也不要停留太长要根据组织大小来确定其脱水时间！我们一般按正常大小取材！1、70%酒精30分钟到1小时左右！
                     2、80%酒精1.5小时左右。
                     3、90%酒精1.5小时左右。
                     4、95%酒精2小时左右。
                     5、无水酒精2到3小时。（或者是用正丁醇或者其他的好一点的脱水剂）
                     6、二甲苯2缸个3到4个小时！
效果还可以！