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我的巴氏染色步骤有问题么?

我的巴氏染色步骤有问题么?

95%乙醇固定10-20分钟→80%乙醇30秒→70%乙醇30秒→50%乙醇30秒→水洗30秒→苏木素染色5分钟→水洗30秒→0.5%盐酸酒精3-5秒→水洗30秒→氨水溶液30秒→水洗10分钟→50%乙醇30秒→70%乙醇30秒→80%乙醇30秒→95%乙醇1分钟→橙黄G染色3分钟→95%乙醇30秒→95%乙醇30秒→EA50 5分钟→95%乙醇30秒→95%乙醇30秒→无水乙醇1分钟→自然晾干→中性树脂封片。
请大家帮忙看看我的染色步骤是否有问题,我们做的巴氏染色片子效果总是不理想,细胞总是染不出绿色,不知道问题出在哪里了。

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EA50 5分钟?
可能是配的有问题,  我只要20秒
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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引用:
原帖由 dingwei 于 2008-12-25 13:39 发表
EA50 5分钟?
可能是配的有问题,  我只要20秒
丁老师,可否告知EA50的配置步骤呢,我们科一直没有研究出正确的方法,望老师指点一下,万分感谢!

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主页上有http://www.dingw.com/detail-87.html
个人认为还是EA36染的好
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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配好后染液滴在滤纸上的颜色
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本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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丁老师,EA36配置时三种溶液混在一起会产生沉淀,需要过滤以后才能用么?

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你的染色步骤太烦琐,下面步骤请参考!
95%酒精(固定5~10分钟)→水洗(简单洗去酒精即可)→苏木素(5分钟)→水洗(简单清洗)→0.5%盐酸酒精分化液(不超过3秒)→水反蓝(1分钟左右,如果颜色较淡可延长反蓝时间)→75%酒精→橙黄溶液(2~10秒)→85%酒精→95%酒精→EA50溶液(1分钟)→95%酒精→95%酒精→95%酒精→无水乙醇→无水乙醇→无水乙醇(3分钟)→放置TO里面湿封片!

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以上染色方法简洁,时间短,染色质好!

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橙黄G染色3分钟?这么长
我最多半分钟
还有橙黄G后有没充分洗净

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