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求助，各位高手，冰冻切片----免疫组化问题

dianxin123

新手上路

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1# 大 中 小 发表于 2009-5-25 09:11  只看该作者

求助，各位高手，冰冻切片----免疫组化问题

我做的的是 鸡小肠的冰冻切片，切到5微米，放入-20保存，第二天冷冰丙酮固定，常规免疫组化做法。
但是加3%的双氧水后起气泡？？？？是因为过氧化物酶太强吗？还是不正常的啊？
还有DAB显色后不能发现大量细胞核，有空泡现象
请大家帮我分析一下
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6504339

中级会员

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2# 大 中 小 发表于 2009-5-25 12:06  只看该作者
图太模糊！应该是组织自溶了！先固定再保存到-20度！

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dianxin123

新手上路

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3# 大 中 小 发表于 2009-5-27 09:20  只看该作者
顶一下，会是冰晶造成的吗？

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6504339

中级会员

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4# 大 中 小 发表于 2009-5-27 10:39  只看该作者
嗯！把组织放入液氮中速冻10-20S，用OCT包埋切片，冰丙酮固定在保存到-20度，或者在20%-30%的蔗糖溶液高压脱水,冰箱4度过夜，组织沉淀后，取出用 PBS冲洗后OCT包埋切片可降低冰晶化程度。

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shanghainese

版主

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Member
5# 大 中 小 发表于 2009-5-27 14:12  只看该作者
引用:
原帖由 dianxin123 于 2009-5-27 09:20 发表
顶一下，会是冰晶造成的吗？

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