为什么传统的脱水方法很多人做不好?
精典的脱水方法,酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡,是最简单、方便、容易掌握,也是最便宜、效果最好的方法。酒精对组织脱水时间的宽容性很大,只要脱干净了,时间相差一点也不会影响组织的效果,如85%、95酒精浸一、二个小时和在液体里过夜相差并不大,这么容易掌握的东西为什么总难以把握呢?
原因在于我们一种根深蒂固的观念:
错误一、节约:酒精再便宜,也要节约,因为有了无水酒精,所以很多人更换试剂都是采用第一道倒掉,从后面往前移,觉得这样能省不少酒精,后面倒掉很心疼。岂不知这样的结果是不断地从高浓度的酒精向低浓度的酒精更换,低浓度的酒精浓度越来越高,由于高浓度的酒精能使蛋白质凝固的特性,使组织表面发硬,导致酒精无法浸透到组织深处,造成脱水不佳。同时,经组织处理后的酒精含有大量的脂肪、蛋白质,长期使用,也在一定程度上影响了脱水的效果。
脱水套液很多人使用后的确改变了以往组织脱水不净的现象,质量也提高了。为什么呢,因为厂家不会提供可供更换用的最后一道液体,你到时更换试剂,就是再贵,也要全部倒掉一起更换,这时候我们就不再心疼了,所以也就达到试剂设定的效果。这里面还包括了固定液、浸蜡用的石蜡、苏木素、依红等等,由于都是成套供应的,你必须都得换,也就达到了量化控制的标准,在一定程度上起到了规范化的作用。
如果我们把这个问题搞清楚了,规范地更换试剂,组织处理和常规制片也就变得非常简单了。回过头来看,你会发现精典的方法不仅能做好,而且能节约更多的钱。
错误二、脱水会过度,过了组织会发脆。其实组织脱水不会过,只会不够;组织发脆的原因往往是组织固定不充分,酒精使组织发硬。不是组织脱水过了,而是脱水不够或由于质地太细腻、切的时候太冰了。
解决方法:规范地更换试剂:
量化,根据我们统计,500ml酒精一般能处理500-600只蜡块。到其数量就应该更换。固定液和第一道石蜡也同时更换。
(1)、方法一:倒去75%,85%,95%(第一道),100%(第一道),二甲苯(第一道),石蜡(第一道)。将95%第二道移至95%第一道,100%第二道移至100%第一道,二甲苯第二道移至二甲苯第一道。石蜡往前移。新配:75%,85%,95%第二道,100%第二道,二甲苯第二道,石蜡最后一道。
(2)、方法二:全部换新的,这是比较好的方法。
(3)、苏木素500ml染1800-2000张切片后更换,依红4000张切片左右更换。切片很少的单位,也要有时间限度,一般来说,如果苏木素过滤后第二天又出现氧化结晶,说明已经过氧化,就不能再用了。
这样就能做到既节约又规范。