lovefan

[email]各位前辈大侠，本人想请教2个问题：
问题1：在做免疫组化显色结束，梯度酒精脱水，二甲苯透明后，是直接封片呢还是要等二甲苯风干后再进行封片？即片子是湿封呢还是要干封呢？因为本人前2天是干封的，结果片子全变白了，背景也变得更深了，原本好好的目标染色细胞根本无法看出了，真是郁闷啊！
问题2：封片用的中性树脂是用二甲苯稀释的吗？如果是的话，稀释度是多少啊？如果不是用二甲苯稀释，那用什么稀释呢？

    敬请各位前辈高手大侠指教啊！谢谢啦！[/email]

fangdang

1：在做免疫组化显色结束，梯度酒精脱水，二甲苯透明后，是直接封片呢还是要等二甲苯风干后再进行封片？都可以：我更建议透明后周围稍微擦拭直接封片，这样的片子在观察时更好观察。南方的人们多少把二甲苯掺入中性树胶中，没有比例和浓度的讲究这要稀释就好了，不过要预先稀释，不然会有很多气泡。显色后退色？很少遇到如此情况除非是AEC显色被苯和醇溶解。

蓝斑

中性树枝还要稀释啊？汗死。。。我们这边都不稀释的，还好。不过没有和稀释后的树枝封片做对比，所以不知道哪个效果更好哦。
不过是有很多说二甲苯稀释的，那这样看来，二甲苯透明后就没有必要一定风干之后再封片了，是不？

jianjie

中性树胶要加少量二甲苯稀释。建议风干后直接用二甲苯稀释好的中性树胶封片。保证三个月内没事。什么脱水啊透明啊统统不要。简单的方法。不信你试试看！

jianjie

一般100ml中性树胶加1ml二甲苯

蓝斑

引用:

原帖由 jianjie 于 2007-10-30 16:17 发表
一般100ml中性树胶加1ml二甲苯

这个比例的话，中性树胶也没怎么被稀释啊？？

喆嫣

濕封的吧!~你濕的話,就不用稀釋的麻煩啦~~!

lijie208239

是的 我们脱水还是要的但是透明这步就免了，那个二甲苯实在是讨厌，让人闻了就生厌，还有害。

柳玉山

脱水透明后直接封片就好了，二甲苯中多放一点时间会透明效果更好，一般20min

shanghainese

20min ？
Are you kidding?