王华

有一个经常发生的现象不知大家曾经仔细观察并思考过原因没有：
用95%酒精固定的组织切片与甲醛固定的组织切片有什么不同？
酒精固定的组织切片出现胞浆胞核“一边倒”的现象是什么原因？
如果把这个问题想清楚了，也会明白为啥细胞涂片用酒精固定不会脱片了。

如果用别的固定剂固定细胞，如何做到不掉片呢？

开动脑筋思考一下，脑子是越用越灵活的哟！

dingwei

很好的问题，我一直就是只知其现象，不知其原因。

guting2006

是不是和酒精是还原剂有关啊？不会和组织蛋白质发生交联，不破坏组织与玻片之间的结合？不是很了解，请赐教

[ 本帖最后由 guting2006 于 2011-11-17 09:46 编辑 ]

王华

我觉得应该先考虑下面这个问题：
酒精固定的组织切片出现胞浆胞核“一边倒”的现象，胞浆胞核倒向那一边？为什么？

dingwei

酒精固定的组织切片出现胞浆胞核“一边倒”的现象? 这我一直没发现，今天仔细看了酒精固定的切片，也没这种感觉，能否用图说明？ 谢谢。我感觉酒精固定的差异在核染色质：不均匀、常不规则聚集在核膜周围，经常会出现核中染色质空白区。

天涯无风

第一：酒精固定的原理是使蛋白质发生沉淀聚集，所以切片在固定的时候，核作为一个整体往往会由于重力的作用而偏向一方。
第二：会不会脱片应该跟涂片的厚薄、细胞的粘附力、固定时间的长短有关系，酒精由于固定迅速，所以一般在短时间内就不那么容易脱片了，如果延长时间，福尔马林的效果应该是一样的。

王华

图片现在暂时没有，要等回科室才能找来拍拍啦。

“酒精固定的差异在核染色质：不均匀、常不规则聚集在核膜周围，经常会出现核中染色质空白区”也是酒精固定的特点。
如果是酒精固定的组织，在组织外周的边缘的细胞会出现一种胞浆胞核向中央“偏向”的现象，特别是一些细胞大的组织，如肝组织等，这种现象会更明显。
组织中央就不明显了。
这种“偏向”现象在细胞涂片是看不到的。

在我们医院，有时外科门诊的医生会用酒精固定外科标本或肝穿组织，显微镜下一看就知道是酒精固定的，逃不出俺的“火眼金睛”啦！

[ 本帖最后由 王华 于 2011-11-17 20:40 编辑 ]

王华

我觉得应该从酒精固定的原理出发，思考一下酒精对组织和细胞中的各种分子的作用，更能理解问题！

印度心灵大师克里希那穆提说：“如果对问题有深入的理解，答案就会出来了”。

[ 本帖最后由 王华 于 2011-11-17 21:02 编辑 ]

dingwei

用95%酒精固定的组织边缘有一圈细胞明显收缩的组织带，特别是小标本。这也是蛋白质碰到高浓度酒精发生凝固的特点吧

王华

95%酒精和75%酒精固定的效果一样吗？