王建君

固定：酸性福尔马林（150ml甲醛，800ml水，50ml冰醋酸）
改刀后水洗30分钟
脱水、透明：           大鼠                  狗
      80%乙醇          2小时               2小时           
      95%乙醇          1小时               1小时
      95%乙醇        1.5小时             1.5小时   
     无水乙醇          2小时               2小时
     无水乙醇          2小时               2小时
       二甲苯         15分钟              20分钟
       二甲苯         15分钟              20分钟
           蜡         15分钟              15分钟
           蜡         30分钟              30分钟
           蜡         30分钟              30分钟
包埋，切片
染色：
     二甲苯             5分钟
     二甲苯            10分钟
     二甲苯            10分钟
     无水乙醇          涮洗3次
     95%乙醇           涮洗3次
     90%乙醇           涮洗3次
     80%乙醇           涮洗3次
     70%乙醇           涮洗3次
        水洗             3次
        苏木            5分钟
        水洗             3次
    盐酸酒精           涮洗3次     
        水洗             3次
        氨水           涮洗3次
        水洗             3次
        伊红            5秒钟
      95%乙醇          涮洗3次
      95%乙醇          涮洗3次
     无水乙醇          涮洗3次
     无水乙醇          涮洗3次
       二甲苯            5分钟
       二甲苯           10分钟
       二甲苯           10分钟

以上时间只针对于新试剂而言，另只做参考，
做实验病理的同行如有不同意见，敬请指教。
            
      
     

叶子

可以向您请教一些非常规问题吗？是相关病理技术的。

王建君

没有问题，请说吧。

法医

我真的不清楚你们为什么这么喜欢用二甲苯透明？难道就是因为时间短吗？但是组织在二甲苯里时间稍微长一些就会发脆，尤其是小动物的组织。我还是认为氯仿更优良，不管怎样，组织在里面过夜都不会发脆。而且毒性要少于二甲苯。

王建君

可否请教，用氯仿透明的程序。

法医

不敢说请教，毕竟我也是新手。只是互相探讨。用氯仿透明的程序与用二甲苯的程序一样，只是简单的把该用二甲苯的步骤换为氯仿罢了。不过氯仿处理组织的时间要长于二甲苯时间至少要乘以4。而且氯仿处理组织不像二甲苯那样，可以清楚地看到透明完成，用氯仿透明完成的组织也是不很透明的。总之，用氯仿是一个经验性的工作，你可以实验一下，看用多少时间合适，而且透明终点如何掌握（组织的形态）。反正我应用于人体组织，厚度为4毫米以下的组织一般处理至少6个小时，再短的时间我没试验过。

shanghainese

如用氯仿透明，就象“法医”说的那样。另外氯仿的毒性绝不少于二甲苯。

法医

--另外氯仿的毒性绝不少于二甲苯。
不敢苟同。你去查一下化学品手册，氯仿的毒性绝对要比二甲苯低一个档次。（当然氯仿也有毒，只是我认为毒性要小于二甲苯）二甲苯的刺激性要远大于氯仿，而且主要是造血系统的影响。氯仿在很早以前还做过吸入性麻醉剂（不信去看看《钢铁是怎样练成的》，里面的哥罗仿就是）只是后来发现更安全的麻醉剂才停止使用的（氯仿长期见光可以生成光气）所以...

POWERMAN

二甲苯是目前最为常用的透明剂，当然其它还有很多，如：甲苯、氯仿、香柏油、冬青油乃至汽油也可用。
透明的目的主要是：以透明剂取代组织内的脱水剂，而透明剂本身又可被石蜡取代，从而完成组织浸蜡。
当然，组织处理（固定、脱水、透明、浸蜡）的最终是要能制成能切出薄片的蜡块，如果有人能发明一种固定后的组织不经过脱水、透明，而能制成石蜡蜡块的方法，那他的贡献可大的不得了。目前，用硬脂酸混合石蜡，以脱水后的组织不经透明便可浸蜡，也不实为一种好的方法。

hhma

同意POWERMAN的意见。二甲苯是较好的也是常用的透明剂，比氯仿利于观察（指组织的透明效果），方便工作。但是一定要根据不同组织设定其处理时间，否则会导致组织硬脆，特别是动物组织。硬脂酸的合理使用，将会减少上述情况的发生。