切片HE染色发灰(切片染色模糊不清，即细胞内染色质及核仁显示不清，呈一片淡蓝色，云雾状。造成组织切片发灰的原因主要与下列因素有关:
1.组织取材固定不当可致染色不均如组织取材过大或过厚(>2 mm)，所用之固定液浓度过大，穿透力较小时，不能将组织固定透或固定不完全，其组织切片经染色后，出现切片外周固定好的部位，细胞着色清晰，但中间或未固定好的组织，细胞着色模糊，从而造成染色不均。
2.组织脱水时间过短。造成脱水不彻底组织中含有水分，进而使透明、浸蜡不彻底。这种处理不彻底的组织，切片易出现片状灰染现象。
3.取材因素在取材时组织标本已经发生**自溶或取材后没能及时固定或固定液浓度不够，必然造成组织结构模糊不清，这是由于组织结构分解变性，使组织变酸，因而切片被染成灰蓝色。另外，固定前已干枯的标本，切片经染色后，在干枯区域内出现成片的灰染现象。
4.固定因素固定剂对组织有一定的媒染作用，它既可与蛋白质结合，又能与染料结合，故能增强着色能力。同时固定剂能沉淀和凝固蛋白质、脂肪、糖、酶等细胞内成分，而这种沉淀和凝固关系能使细胞内成分产生不同的折光率，造成光学上的差异，使得生活情况下原来看不清的结构变得清晰起来。所以，组织固定不良是造成切片染色模糊不清的主要原因。(1)存放标本的固定液浓度不宜过高或过低，有的偏低，有的甚至用纯福尔马林。浓度偏低，在正常固定时间内，蛋白质发生沉淀和凝固必然不充分，由胶状物质变成不溶性的固体状态也必然不充分，使细胞内成分本应产生的不同折光率、光学差异不够显著，组织生活状态下，原来看不清楚的结构也就不能清晰起来。而且由于浓度低、固定不足，其媒染效果也差，故易出现切片模糊不清现象。固定液浓度过高，其对蛋白质的沉淀和凝固作用太强，使组织表面迅速沉淀凝固变硬，减弱了固定液对组织的渗透能力，造成组织中间部分固定不佳，甚至达不到固定目的，同样亦易出现切片模糊不清现象。(2)在送检的标本中，有时临床科室用乙醇固定组织，常温下，乙醇沉淀的白蛋白、球蛋白不再溶于水，而被沉淀的核蛋白则可再溶于水。因此，造成乙醇固定的标本，切片核染色不良，胞质染色也较差，切片出现模糊不清现象。(3)工作中经常发现淋巴组织(淋巴结、鼻咽部组织及扁桃体等)，由于处理不当造成切片染色后组织中间出现发灰现象，其主要原因可能是由于其细胞密集、结构复杂，导致固定液较难渗透到组织深部，从而造成组织中央固定不佳，结果染色不良，而出现切片发灰现象。
5.织(特别是固定不佳的组织)浸蜡、包埋时如果温度过高或切片后烤片温度过高，均会使组织蛋白质发生质变，对染料可能发生拒染，造成切片染色模糊不清。
6.脱钙过度(如骨髓活检标本)亦易造成切片染色发灰。
7.过度处理的标本，特别是细针活检标本。
8.组织用酸性甲醛固定或组织在甲醛中固定时间过久，导致组织切片在染色时易出现着色淡或不易着色，一片发灰。甲醛暴露于日光或与空气接触久置后，甲醛氧化自行分解产生甲酸，而使溶液呈酸性，对伊红的染色较差，严重时可影响细胞核的着色。
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本帖最后由 6504339 于 2010-8-17 16:41 编辑 ]
