淡茶

最近第一次尝试使用湿片封固，但很失败。出现了很多的空气结晶。
我是这样做的：酒精分化后直接放入透明剂中，约10S后提出，直接滴上树胶封固。
请教：酒精后的透明剂用几缸？每缸的时间多长？经过透明剂需要叫片子晾干后再滴加树胶吗（应该是不需要的啊，不然为什么称之为湿封呢）？

以往用的都是干封。

hnzcr

究竟分化后直接放入透明剂中???

淡茶

引用:

原帖由 hnzcr 于 2010-1-9 21:13 发表
究竟分化后直接放入透明剂中???

对，就是酒精分化后直接放入透明剂中。
难道还要晾干之后再放？？？

大志

摘自《临床技术操作规范•病理学分册》
1．石蜡切片HE染色（常规HE染色）
（1）二甲苯Ⅰ                  5～10min
（2）二甲苯Ⅱ                  5～10min
（3）无水乙醇Ⅰ                 1～3min
（4）无水乙醇Ⅱ                 1～3min
（5）95%乙醇Ⅰ                  1～3min
（6）95%乙醇Ⅱ                  1～3min
（7）80%乙醇                       1min
（8）蒸馏水                        1min
（9）苏木素液染色              5～10min
（10）流水洗去苏木素液             1min
（11）1%盐酸-乙醇               1～3s
（12）稍水洗                    1～2s  
（13）返蓝（用温水或1%氨水等） 5～10s  
（14）流水冲洗                  1～2min
（15）蒸馏水洗                  1～2min
（16）0.5%伊红液染色            1～3min
（17）蒸馏水稍洗                1～2s
（18）80%乙醇                   1～2s
（19）95%乙醇Ⅰ                 2～3min
（20）95%乙醇Ⅱ                 2～3min
（21）无水乙醇Ⅰ                3～5min
（22）无水乙醇Ⅱ                3～5min
（23）石炭酸-二甲苯             3～5min
（24）二甲苯Ⅰ                  3～5min
（25）二甲苯Ⅱ                  3～5min
（26）二甲苯Ⅲ                  3～5min
（27）中性树胶封固
注：①（12）和（13）项可省去，但（14）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。
②（23）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。

5．载玻片自二甲苯中取出后，应立即用洁净、光亮的盖玻片和稠度适宜的中性树胶湿封载玻片。封盖处内无气泡，外无溢胶。封片时必须进行操作人员和局部环境的二甲苯污染防护。不应将组织切片烤干或风干后再行封片。

淡茶

谢谢大志。。