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求救FOXP3染色

求救FOXP3染色

各位老师,我目前遇到一个难题,因为实验需要,我要标记FOXP3阳性的调节性T细胞,而调节性T细胞是CD4和CD25阳性,这就意味着可能要进行双标乃至三标,请问三标可行吗?而且CD4和CD25都是胞膜显色。我以前只做过普通的免疫组化,双标都没有进行过。求救各位老师高手大侠们!谢谢

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用流式细胞仪.

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就是没有这个条件啊。。。哭了。。。

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现在流式细胞仪普遍起来了, 许多有流式细胞仪的单位开展了对外服务项目。
您可以找这些单位联系。

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免疫组化不可行,三种都为膜抗原,显色会相互掩盖,而且需要三种不同来源的一抗很难找到。理论上可以用荧光素直接标记一抗,不知道敏感性够不

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CD4和CD25都是胞膜显色。可以用IF双标/三标(CY3,FITC,CY5)。如重叠太多,可以FOXP3-CY3/CD4-FITC和FOXP3-CY3/CD25-FITC。

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