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求助!

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步骤:
1.切片脱蜡至水
2.抗原修复(4张用柠檬酸99℃水浴加热10分钟自然冷却,4张用TE在37℃孵育30分钟)
3.PBS冲洗3×3min
4.滴加抗体C3(1:50和 1:100)37℃孵育1h
5.PBS冲洗3×4min
8张切片均未出现阳性(片子是阳性片)加PI后细胞核成红色
希望各位老师指点下我错在什么地方?谢谢!

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