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急!请教各位老师

急!请教各位老师

    请教各位老师,最近做课题,Caveolin-1基因在胃癌中的表达,做预实验用肺的鳞癌作的,应该在胞浆表达。我们做了1:100,1:200,1:300,1:4004项,前两项均在胞核明确表达,1:200的着色适中,后两项未着色。
    两个问题:1应该在胞浆表达,但反复做均在胞核表达,问题可能出在那里?2几篇文献均用1:400的浓度,可是我们做的这个浓度不表达,不知原因在哪?
    请各位老师帮帮忙,非常感谢!!

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用阳性对照片试一下抗体,看看浓度和表达位置。另外,文献上的抗体浓度不一定就通用啊,因为无论是抗体的厂家、批号、效价还有做实验的条件都是有可能不同的,所以要参考文献,不要照搬文献,还是要做预实验摸出适合自己实验的条件。
认真做事,踏实做人!fighting!!

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谢谢,我们再试试吧。

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