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请教各位

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[这个贴子最后由刘正国在 2003/04/02 08:50pm 编辑]

我在免疫组化的实验当中偶尔会出现这样的问题,个别需要用胰酶消化的组织消化后会出现细胞核肿胀、间质水肿的现象,经调整消化时间、温度和稀释胰酶但效果不佳,渴望高见。

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我个人认为应从以下两个方面考虑:
1、在配制胰酶时,应考虑到酶的最佳pH值为7.6,要在钙离子的激活下,并于37度内才能达到最佳效率。
2、经酶消化后的切片应充分洗涤,否则会对抗体或组织进行缓慢消化,影响抗体的结合,破坏组织结构。
   

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引用:
下面引用由刘正国2003/04/02 08:48pm 发表的内容:
我在免疫组化的实验当中偶尔会出现这样的问题,个别需要用胰酶消化的组织消化后会出现细胞核肿胀、间质水肿的现象,经调整消化时间、温度和稀释胰酶但效果不佳,渴望高见。
我没有遇到过,不过我们现在基本不用消化,改用微波抗原修复。

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I think the problem may be your tissue section quality.  But you can try other antigen retrieval like microwave heat…

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