体液涂片的制作
[这个贴子最后由dingwei在 2003/07/10 10:13pm 编辑]
体液涂片的制作
体液脱落细胞学是一个方便而实用的病理学检查，传统的涂片方法，由于操作不当，会造成制片质量欠佳，细胞核结构不清，影响阳性细胞检出率。现将我科经验介绍如下：
1、涂片制作方法：（根据送检液体外观不同，三个方法制作）
1.1当送检液体黄色略显混浊（细胞成份多）或淡红色（只含少量红细胞）时可用普通离心涂片法：吸取两试管液体各10毫升，平衡，放入离心机，3000转/分，时间5～10分钟。离心后将试管内液体倒干，倒置于吸水纸上20秒钟，吸去管口剩余液体，然后再用吸管吸取沉淀物涂片。这样做的片子，由于水份少，所以细胞成份多，并且比较集中。
1.2当送检液体较清（细胞成份少），送检量少于50毫升时，可用重复离心法或滤过膜法：细胞离心后倒去上清液，再加入未离心的液体，反复多次，最后吸干剩余液体用吸管吸取沉淀物涂片。这样可以增加细胞的数量。滤过膜法：去除细胞采集器上抽吸部分，将注射器直接连在滤过器上，拔去内芯，在体液内以1：1的比例加入50%的酒精，混合后，倒入注射器内，体液通过滤膜从另一端流出，直至体液停止流动为止。倒去注射器内残留体液，取出滤膜，将滤膜细胞面向上放于刚倒上95%酒精的纸上，用载玻片压在膜上（此时，细胞和滤膜均粘在玻片上），然后去除滤膜，立即固定。
1.3如果送检标本有大量的红细胞,可用50%酒精等量混合后,再用普通离心涂片法制片。结果红细胞被溶解，肿瘤细胞大量增多，细胞形态保存完好。
1.4 涂片的固定：
细胞制成片后，立即放入固定液（95%酒精与甲醇1:1混合）固定。如干燥后再固定的涂片容易造成细胞核退变，核仁不清，核膜不明显，核染色质模糊等现象。
2、讨论：
传统的离心涂片制作，往往倒去上清液后，试管壁上还有大量液体，当沉淀物吸出时，这些液体也跟着被吸出，稀释了细胞，涂片后细胞数量少，细胞分散，而且由于水份多，不能立即固定，细胞核固缩或退变，影响诊断。而细胞含量少的液体，离心的量不可能很多，每次只能检查20ml左右，往往整张涂片只有几只细胞，极容易漏诊。如遇到血性液体时，沉淀物中有大量的红细胞，有时整片涂片都是红细胞，影响了癌细胞的检测率。当在有血的体液内等量加入50%酒精后，红细胞被溶解，而滤膜技术的应用，可以处理大量的液体（在500mL以内），增加了细胞的数量，阅片时省时省力，减少了漏诊率的发生，从而提高了阳性率。95%酒精与甲醇1：1混合固定液，可减少湿片固定时细胞过渡收缩或脱落。湿片固定保正了细胞的原有的形态，核仁明显，核膜及染色质清晰，有利于细胞性质的准确判断。
参考文献:
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