sjingx

我在制备游离细胞（精子、细菌、培养细胞等）的超薄切片时，用琼脂对样品预包埋，发现树脂的渗透效果很不好，请问，除了用琼脂外，还有其他更好的方法吗？

fzxd888

可以用血清或抗凝血浆做预包埋，效果不错。

sjingx

请问：血清或抗凝血浆的浓度是多少？具体怎样操作呀？

fzxd888

可以用平常用于培养的小牛血清与经过离心沉淀处理的培养细胞混合，加2.5%戊二醛固定液即可；或者用抗凝血经5000转/分离心沉淀后取上清夜与培养细胞混合固定。如果细胞数量足够的话，可以直接在0.5ml离心管内进行处理，不过每个步骤完了以后都要离心一次，且吸上清液时最好用细针筒吸取，动作要轻柔，效果也不错。

sjingx

多谢指教！但是有些步骤我还是不太明白。请问，怎样使呈液态的血清凝固呢？（在用琼脂作预包埋时，温度降低琼脂就固化了） 是加上戊二醛后就固化了吗？

fzxd888

将游离细胞与血清混合均匀后再进行离心沉淀，吸上清夜后沿着管壁缓慢加入固定液，动作要轻，防止细胞团散开，然后在冰箱内固定即可，血清可以凝结成团的，试试看。

sjingx

好的,我试一下.多谢斑竹指教