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就我在进行超薄切片时遇到的问题请教各位老师

就我在进行超薄切片时遇到的问题请教各位老师

各位老师:
1、请问切片时,环境温度和湿度应该保持在什么范围内?如果环境湿度过高,如何调节
:em14:
2、我在制作海绵原细胞超薄切片时,用1.5-2%的琼脂进行予包埋,然后修成2立方毫米的小块,再进行正常的步骤。在修块时发现树脂的硬度正好,而其中的样品似乎硬度较大,在切片时也发现,切片的树脂部分衍射出绿色(半薄)而样品部分没有衍射色,光镜下观察可见样品部分不成片,破破糟糟的。海绵细胞本身是很软的,请问是予包埋的琼脂浓度太大了,还是样品浸透得不彻底?还是用中间剂浸泡的时间太长(我泡了将近一小时) :em06:
3、关于机器故障:我用的是机械进杆式的超薄切片机,使用时发现手论的转动不很顺畅,有时感觉好像有点涩,在感觉到涩的同时样品杆就会发生震颤,特别是在切超薄片子时。请问这是因为机器缺油吗?但我找不到加油口,难道还要拆开机器加?
十分感谢!! :em16:

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1、关于环境湿度问题,一般要求湿度在70%以下,环境温度在25度左右,最好配备除湿机和空调。
2、关于琼脂预包埋法,我们现在都不用了,由于琼脂包埋后很容易引起渗透或聚合不良,建议用血清或抗凝血浆混合预包埋,这样效果不错的。
3、至于切片机的问题,最好与生产厂家联系解决,估计是机械故障引起。

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多谢指教!

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