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『 免疫组化』
» 各位帮帮忙 为什么肝脏的片子做成这样
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各位帮帮忙 为什么肝脏的片子做成这样
hy952
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发表于 2010-3-16 23:57
只看该作者
各位帮帮忙 为什么肝脏的片子做成这样
DAB染色 DAB一滴上去 就变黄了 很快 几乎是滴了就马上用自来水冲了 染的是巨噬细胞 但是看着不像
用的是Envision免疫组化检测试剂(鼠/兔)二抗 没有生物素 ,用3%H2O2甲醇去内源性过氧化物酶
3%BSA封闭 抗原修复 枸橼酸 微波2.5min高火 7.5min保温 各位高手 哪里出了问题呢
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colin
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发表于 2010-3-17 17:33
只看该作者
操作过程中,有没有切片干燥或者是各个步骤过后洗片没有洗干净呢?
看上去主要是背景的问题。
还有可能就是DAB过期了,或者配制的问题!
Just turst youself!
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hy952
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发表于 2010-3-18 09:35
只看该作者
没有出现切片干燥,DAB是今年的 应该也不会过期 洗片也不会有问题 都是TBS 5MIN*3
会不会是内源性过氧化物酶没有阻断好呢
血管周围 染色都这么深 这么多非特异性染色
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发表于 2010-3-18 14:26
只看该作者
是小鼠的肝脏吧?
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menglei2046
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发表于 2010-4-3 02:25
只看该作者
你这个可能不加一抗都一片黄
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