九日

2. 1　漂烘仪　漂烘仪的温度通常控制在低于所使用包埋石蜡熔的5～10 ℃左右。如果切片过薄、水温过高或切片漂片时间过长,会导致组织切片产生类似“地图纹”样的裂隙(图19) 。涂胶液残留在载玻片上,切片的边缘或组织背景上经染色后留有红色深染物质(图20、21) 。组织切片在漂烘仪展片时形成的气泡,经烘/烤片后染色时气泡破裂,造成破裂区域染色深染(图22) 。前面切过的组织碎屑遗留在漂烘仪的水面上,继而污染在后面的组织切片上,这种情况在某些病例甚至可能造成错诊或误诊(图23～25) 。所以漂片时必须时刻保持清洁,防止污染。每个蜡块切完后都要养成用干净的纸巾清洁水面的好习惯。皮肤切片边缘折叠:切片烘/烤片时没有完全黏附在载玻片上,尤其是边缘部分在染色时卷曲,形成折叠(图26) 。这种情况以皮肤、胃肠活检等小标本多见。遇此类情况,组织切片在漂烘仪水面上应该多伸展片刻,会有所改变。切片在漂烘仪水面没有完全展开形成皱折:如图27所示,是子宫肌瘤组织切片,蜡带或蜡片在水面上如有皱折应尽快用镊子轻轻撑开。切片在漂烘仪水面没有完全展平,与载玻片帖附不牢固,形成波浪状起伏,显微镜下难以聚焦(图28) 。此类现象以皮肤与质地硬的组织多见,切片在水面上多展一会,能防止此种现象产生。
2. 2　烘/烤片仪(图29～32) 　脱蜡前因为水和二甲本混合不相容造成脱蜡不尽,为了使切片上的水分干燥,一般使用热台或烤箱。若切片上有蜡斑残留,将会影响切片的染色。如果发生这种情况,必须先用无水乙醇吸去水分,把切片放回二甲苯处理脱去残蜡。切片再经过无水乙醇、95%乙醇到水,进行所需要的染色。烤/烘不完全的会造成切片从玻片上的脱落,则无法按上述的方法补救。但是,在烤/烘时切片受热过度也会导致严重的人为改变,甚至影响染色结果　常规制片使用的切片石蜡,通常选用其熔点为56～58℃的石蜡。热台或烤箱对玻片而言通常保持温度在石蜡熔点即60 ℃左右。切片在强热56～60 ℃恒温箱里烤片至少1h才不至于脱片,推荐58～60 ℃恒温箱里烤片2 h,也可以在58～60 ℃恒温箱里过夜烤片,但不能进行高温烤片,原因是在干燥的条件下加热切片可以加速组织中抗原的氧化而破坏组织中抗原。　如果并非急诊病理诊断需要,可以放在空气中受热过夜,这对有照相需要的切片尤为有利。强热空气中烤片玻片与热台直接接触,一般只需要7～10 min,但是在温箱或烤箱一类的地方玻片不与热台直接接触,大约需要1 h,才能保证切片被烤干。切片需要做免疫组化染色的可以放在温箱过夜,温度必须低于60 ℃,否则抗体会受到破坏。如前所述,切片过度受热会产生人为改变,特别是切片没有被很好的烤干。有人把细胞核空洞样改变归属于切片从水中裱起后就立即受热过度,温度高于60 ℃以上。
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此文转载《临床与实验病理学杂志》续篇
作者：马恒辉,周晓军

[ 本帖最后由 九日 于 2011-2-22 15:23 编辑 ]

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