蓝精灵903

老师们：你们做免疫组化一抗作用的时间是多少？温度是多少？可以用普通电热恒温烤箱代替恒温水浴烤箱吗？天冷的时候我把湿盒放进普通电热恒温箱内30度作用一小时可以吗？这样会增加免疫组化片的非特异性染色吗？

dingwei

一般是37度作用1小时，不会增加免疫组化片的非特异性染色。普通电热恒温箱可以用，但隔水式培养箱更好。

蓝精灵903

谢谢丁老师，我现在是一抗室温（20-22°C一小时),然后放冰箱过中午。下午再完成下半部分的操作，觉得效果也不错，但操作时间长些，因下午还要切明天的做免疫组化的片子。要是能在上午完成就好些（我们每次平均有100多个抗体，一个人手工操作做），我也试过放在电恒温烤箱37°C一个小时，可感觉非特异性染色很多，特别是浆表达的抗体，可能是烤箱温度太高影响，我觉得能否在电烤箱的最低层放水，然后把温度调在30度左右，把湿盒发在上面2层上一抗作用一小时呢？

dingwei

每次平均有100多个抗体，一个人手工操作做，应该在中午12点前就可以完成阿，一般加完一抗大约在9点左右。20-22°C一小时与37°C作用1小时强度上是有差异的。

蓝精灵903

谢谢丁老师，我们会进一步改进，看如何能做到好和快。也希望各位老师能给些好的建议，谢谢！