返回首页
|
病理技术专题
|
病理资讯
|
病理图库
|
病理技术精英
|
同行交流
|
技术会诊
|
点滴经验
|
常规切片
|
特殊染色
|
分子免疫
|
细胞园地
|
电镜技术
|
收藏本站
注册
登录
会员
搜索
统计
帮助
中华病理技术论坛
»
『 同行交流BBS 』
» 脑组织免疫组化求助
‹‹ 上一主题
|
下一主题 ››
发新话题
发布投票
发布商品
发布悬赏
发布活动
发布辩论
发布视频
打印
脑组织免疫组化求助
gutou
初级会员
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
1
#
大
中
小
发表于 2014-1-6 11:52
只看该作者
脑组织免疫组化求助
常规脱蜡至水,柠檬酸ph6.0微波修复高火7分钟 低火7分钟,一抗博奥森浓度1比100 ,4度过夜,37度复温1小时。二抗北京中衫37度17分钟(15分钟未见阳性),三抗37度15分钟。DAB北京中衫显色5分钟。
片子上会出现很多片状假阳性斑点,求教是为什么!如何解决。谢谢! 每步骤后面都有pbs洗3次。
[
本帖最后由 gutou 于 2014-1-6 12:01 编辑
]
附件:
您所在的用户组无法下载或查看附件
UID
23411
帖子
11
精华
0
积分
93
阅读权限
20
在线时间
155 小时
注册时间
2011-9-13
最后登录
2021-1-29
查看详细资料
TOP
willfirm
中级会员
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
2
#
大
中
小
发表于 2014-1-6 12:28
只看该作者
做的什么指标?克隆号?
一抗孵育时间一般不需要那么长,37摄氏度40min。一抗稀释度也需要多次摸索。
二抗,孵育时间,15和17min的差别不可能这么明显,看是不是操作过程的问题,比如一抗干片?上抗体之前玻片不要甩太干了。在pbs中加入0.05%tween20,用阻水笔把组织圈起来。
这张片子采图很模糊,最好重新采。
UID
25050
帖子
125
精华
0
积分
455
阅读权限
30
在线时间
388 小时
注册时间
2012-7-28
最后登录
2015-2-20
查看详细资料
TOP
gutou
初级会员
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
3
#
大
中
小
发表于 2014-1-6 16:00
只看该作者
谢谢,我再试试,请问还有其他可能没有呢?! 我们怀疑和固定是否有关系,组织固定采用了灌注固定法!
[
本帖最后由 gutou 于 2014-1-6 16:01 编辑
]
UID
23411
帖子
11
精华
0
积分
93
阅读权限
20
在线时间
155 小时
注册时间
2011-9-13
最后登录
2021-1-29
查看详细资料
TOP
willfirm
中级会员
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
4
#
大
中
小
发表于 2014-1-7 12:23
只看该作者
回复 3# 的帖子
你做的动物模型?
如果是,那就要看你的抗体选择是否正确
UID
25050
帖子
125
精华
0
积分
455
阅读权限
30
在线时间
388 小时
注册时间
2012-7-28
最后登录
2015-2-20
查看详细资料
TOP
chenbing
新注册
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
5
#
大
中
小
发表于 2014-1-8 00:57
只看该作者
看这架势应该是全片非特异的斑块样着色,先去好好检查检查抗体选对没,博奥深的一般是多克隆干粉,还是需要花点经历摸条件的。
UID
22324
帖子
2
精华
0
积分
13
阅读权限
1
在线时间
11 小时
注册时间
2010-10-12
最后登录
2014-6-4
查看详细资料
TOP
gutou
初级会员
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
6
#
大
中
小
发表于 2014-1-8 18:51
只看该作者
灌注固定30分钟后没有再次固定,也没有冲洗,直接冰箱里4度沉糖,是否是原因呢?
[
本帖最后由 gutou 于 2014-1-8 18:53 编辑
]
UID
23411
帖子
11
精华
0
积分
93
阅读权限
20
在线时间
155 小时
注册时间
2011-9-13
最后登录
2021-1-29
查看详细资料
TOP
willfirm
中级会员
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
7
#
大
中
小
发表于 2014-1-8 19:40
只看该作者
回复 6# 的帖子
30分钟,太短了。。至少六小时。
UID
25050
帖子
125
精华
0
积分
455
阅读权限
30
在线时间
388 小时
注册时间
2012-7-28
最后登录
2015-2-20
查看详细资料
TOP
yizhonghk
初级会员
个人空间
发短消息
加为好友
当前离线
8
#
大
中
小
发表于 2015-6-24 10:15
只看该作者
学习了
UID
27704
帖子
38
精华
0
积分
141
阅读权限
20
在线时间
12 小时
注册时间
2015-5-14
最后登录
2015-9-27
查看详细资料
TOP
‹‹ 上一主题
|
下一主题 ››
控制面板首页
编辑个人资料
积分记录
公众用户组
个人空间管理
基本概况
流量统计
客户软件
发帖量记录
版块排行
主题排行
发帖排行
积分排行
交易排行
在线时间
管理团队