关于电镜标本取材失误的思考
大家都知道电镜取材的重要性,但是许多实验者却忽视了取材环节的重要性,特别是研究生的取材样本,大多出现或大或小的失误,比如组织块大,中间部分固定不良,或取材时间长导致缺血缺氧时间过长导致细胞变性,或者灌注固定操作不到位导致细胞水肿等等问题。为什么会出现这些问题呢?我想,这个与学生及指导老师对取材的重视程度不够或根本不懂电镜样本取材的方法和要求。另外一个原因可能是没有对实验者和研究生开展电镜技术相关教学所致。另外,除了实验动物组织活检之外,培养细胞的取材和定位也是容易出现失误的环节。一般培养细胞都要经过离心沉淀法制作,而我们切片的部位往往都是从底部开始切片,这样,就会出现一个问题,由于离心作用,体积和质量比较大的细胞会首先沉积底部,而一些体积小的或质量小的细胞比如萎缩的细胞、凋亡细胞以及去除细胞器细胞等都会留在离心块的上层,按常规切片很难切到上述细胞。因此,我们的处理是将离心好的细胞团的中上部取下来制作包埋块并定向包埋,保证切面包括从上至下的多层细胞,这样才全面。
希望大家在取材方面有好的建议请提出您的宝贵建议。