qq

[这个贴子最后由qq在 2005/01/24 11:51pm 编辑]

石碳酸 盐酸酒精 美蓝   三步染脱蜡切片,总是失败,即使HE很明显的结核结节都看不到结核杆菌,请过路的高人给指点一下迷津!!!!!!!!!!!!!!!!
谢谢谢谢谢谢!! :em23:  :em23:  :em23:  :em23:  :em23:

解释一下,我搞技术兼搞诊断,科室规模小,原来也没搞过抗酸,自己看书摸索的,不知道问题出在那里,很希望得到解决

liuhuaqin

抗酸染色操作方法不是很复杂，但在石蜡切片中显示结核杆菌相当难做，你最好在相近的大医院找到阳性片和你的标本一起做，只有做好阳性片，才能说明你的试剂和方法没问题。

qq

能不能详细地说说呢,难做在那里,原因在那里呢?主要问题是试剂吗?

谢谢

qq

我做抗酸的做法是先用石碳酸加热到有蒸汽,放置,五分钟左右,然后盐酸酒精清洗到不掉色,然后再滴盐酸酒精放置五分钟,过后美蓝三分钟,清水冲洗烤干

我想原理是脂膜加热后,染料才可以进去,盐酸酒精洗不掉杆菌里面的复红,美蓝染背景,至于细节上有什么考究的我就不知道了,能告知一二吗?
谢谢

ylzhao

[这个贴子最后由ylzhao在 2005/01/25 11:16pm 编辑]

modified stain method
http://home.primus.com.au/royellis/afb.htm
http://www.bioon.com/experiment/histolog/histolog4/200407/59769.html

ylzhao

切片在石碳酸品红液中加热到有蒸汽后维持五分钟或将切片置石碳酸品红液中烤箱内65度40分钟。盐酸酒精分化1分钟，水洗2分钟。0.25-0.5%美蓝对比染色1分钟。如果还染不出来就考虑加阳性对照。若对照阴性考虑试剂和方法有问题；对照阳性说明结果可靠。不必再重复实验。

qq

[这个贴子最后由qq在 2005/01/26 10:20pm 编辑]

谢谢,我明天试验一下,切片厚薄关系大吗?

liuhuaqin

尽量薄一些。

深泉

在石碳酸里可以加热多染一会儿。不过我觉得不是每张结核片都可以染到抗酸杆菌的，不要强求。