精灵之音

我前一段时间做神经纤维银染，染的效果很好，但是发现局部有黑色颗粒出现。
中间好象是一个致密的黑色颗粒，外周有一圈空晕，周围组织染色清晰。
不知道这些黑色颗粒是什么，我的试剂都过滤了，还能有什么原因呢？

精灵之音

没人理我，会不会解释的不清楚？
传两张照片，我的显微镜比较破，我用数码相机拍的，不太清楚，但能看到轮廓了。

精灵之音

大家快来帮我分析一下吧，我六月份毕业，老板说要给他染将近一千张片子才能毕业。我是做分子的，同学也都没做过特染，哪能这么快掌握这么多病理知识啊！
我用的是Bielschowsky方法。染色特别重，，用冰醋酸都洗不掉，还有这么多黑点白圈。

ylzhao

通过图片观察,不象石蜡切片,看上去组织很厚,建议用石蜡切片效果可能会有改善.另外,试剂要纯,配试剂的水用单蒸或(双蒸),所用容器要洁净(最好酸处理).

精灵之音

是石蜡切片，试剂也都是用蒸馏水配的，而且还过滤了。

wangqiong

Bielschowsky method
试剂配制：
1。 20%硝酸银: 硝酸银10g+双蒸水50ml(新鲜配制)
2、 氨银乙醇液
20%硝酸银水溶液30ml中加入20ml无水乙醇，混合出现乳白色沉淀；注滴加氨水，直至形成的沉淀刚刚溶解；继续加氨水5滴；过滤三次（器材必须非常清洁）；置于棕色瓶中避光保存。
3、 5%硫代硫酸钠固定液
    5g硫代硫酸钠，溶于100ml双蒸水中，避光保存。
4. 0。2％氯化金  0.2g氯化金溶于100ml双蒸水中，避光保存
实验步骤
1、 石蜡切片5um脱蜡及脱水、 双蒸水清洗三次。
①玻片入二甲苯7min×3
②100%无水乙醇2.5min×2
95%无水乙醇2.5min×3
70%无水乙醇5min×1
双蒸水5min×3
2、 20%硝酸银水溶液中37度温箱避光浸银30min。（25－35分钟）切片变成浅棕色，倾去硝酸银水溶液，双蒸水洗三次。
3、 10%甲醛水溶液还原数秒至切片呈微黄色。双蒸水清洗三次。擦干切片背面及组织周围水分，一次5片置于湿盒中。
4、 滴染氨银乙醇液20－40秒，顷去染液直接用 10%甲醛水溶液中浸泡还原1－2分钟，注意转动切片，更换2次溶液，使切片呈棕黄色，直到显微镜下可清晰观察到斑块为止。如染色过浅可继续重复；染色过重可用冰醋酸褪色。双蒸水洗三次。
5、 0。2％氯化金水溶液固定3－5分钟，
6、5%硫代硫酸钠固定3分钟
7、双蒸水洗3－5分钟，然后用滤纸将周围组织吸干。
8、95％酒精及无水乙醇脱水，透明,封片。
结果：轴突，神经斑块和缠结  黑色
      背景：棕黄色

精灵之音

不用氯化金和流代硫酸钠可以吗？我们实验室没有

精灵之音

多谢几位，问题已解决，呵呵