中华病理技术论坛 » 『免疫组化』 » [讨论]

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1^# 大中小发表于 2003-9-11 15:11 只看该作者

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各位老师:
我正在做细胞的免疫组化法,但阳性细胞染色较浅(阴性不着色)我想请教如何能增加染色.我用的是DAB显色剂(三瓶装)

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fangdang

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2^# 大中小发表于 2003-9-12 16:08 只看该作者

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你是细胞培养还是细胞涂片的?染色步骤?如果是细胞培养是否用了Triton－X?

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3^# 大中小发表于 2003-9-12 18:34 只看该作者

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我做的是细胞涂片用的是直接法。

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fangdang

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4^# 大中小发表于 2003-9-16 15:45 只看该作者

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我正在做细胞的免疫组化法,但阳性细胞染色较浅(阴性不着色)我想请教如何能增加染色:看来你抗体定位不错.建议增加一抗浓度,或延长孵育时间.请问你一抗孵育时间和温度?

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5^# 大中小发表于 2003-9-18 16:51 只看该作者

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我现在用的底物是自己配制的效果很好.你可增加过氧化氢的浓度颜色可能会好些.但现在我标记抗体的效价不稳定你有什么好方法吗?

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fangdang

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6^# 大中小发表于 2003-9-26 16:45 只看该作者

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现在我标记抗体的效价不稳定你有什么好方法吗? 你是指稀释后的抗体保存是不稳定?

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7^# 大中小发表于 2003-10-8 17:11 只看该作者

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是稀释前的，稀释又怎样做呢？

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fangdang

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8^# 大中小发表于 2003-10-9 11:03 只看该作者

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是稀释前的浓缩液可放在4度恒温冰箱(切不可结冰)可保存一年.
你用PBS做稀释液?

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9^# 大中小发表于 2003-10-13 16:45 只看该作者

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我作实验用的是1%的小牛血清做稀释液。但酶标单抗是不加稀释直接放到4度冰箱保存的抗体效价降低很快。我刚标记好时效价能达到1：2000现在只有1：500

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