找到的免疫组化各项原理，看了觉得很实用，分享一下
脱蜡与水化
目的：
确保抗体等其他试剂能够充分与组织中的抗原等结合发生反应。若脱蜡和水化不全，易出现局灶性反应和浸洗不全，产生非特异性背景。
相关试剂或操作的作用：
1，
二甲苯：
A,二甲苯能溶解石蜡。
B,染色后二甲苯起到透明的作用
2，
酒精：即可溶解二甲苯又可溶于水
A,去除二甲苯。高浓度的酒精时间久会引起组织便脆，也会影响镜下的形态学观察，故用浓度由高到低的梯度酒精处理。
B,染色后的组织经过从低到高的浓度梯度酒精处理是为了去除组织中的水分，为二甲苯透明组织创造条件，使得组织切片的透明度达到光镜观察时的要求。
抗原修复
暴露抗原决定簇
目的：
由于组织中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定过程中，发生了蛋白间交联及醛基的封闭作用，从而失去抗原性。通过抗原修复，使得细胞内抗原决定簇重新暴露，提高抗原检出率。
主要方法：
1，
高压修复
2，
微波修复：应用高频电磁波打开蛋白间的交联键。
3，
胰酶修复：胰酶消化方法一般用于细胞内抗原
缓冲液
适用于热诱导的抗原表位修复 (HIER) 的缓冲液有多种。CST常推荐的两种缓冲液 是：pH6, 10mM柠檬酸盐缓冲液和pH 8,1mM EDTA缓冲液。缓冲液是否适用于您的实验取决于您所使用的一抗。请查阅产品说明书 中所推荐的用于特异性抗体的修复缓冲液。一般而言，EDTA缓冲液适用于多数磷酸化酪氨酸特异性抗体，而柠檬酸盐缓冲液适用于其他多数抗体。每天都需制备新鲜的1X溶液
煮沸装置
载玻片在所推荐的缓冲液中加热煮沸一段时间后，才可引起抗原修复。该步骤通常在微波炉或高压锅中进行。虽然，一些研究人员也使用水浴锅，但是，因为该步骤中所选择的装置对染色存在积极或消极的影响。所以，建议使用微波炉或高压锅加热煮沸以达到最佳抗原修复效果。
