[求助] 不加一抗,仍有背景着色
请问大家:
我做PR时 子宫,胎盘,卵巢的阴性对照片没有加一抗,而是加入等量的抗体稀释液,结果子宫胎盘的片子很干净,没有着色.但卵巢的阴性对照中尤其是黄体仍成淡棕色(DAB)显色
我用的是武汉博士德的产品,一抗前5%bsa室温20分钟,一抗后,PBS 2min*3;二抗后,2min*3
SABC后5min*4.请大家帮忙指导一下.
同时,据我所查,卵巢中应该有PR阳性反应,可我做的只有在子宫和胎盘中细胞核内有阳性结果,而卵巢中没有结果.一抗1:100,1:200,都是如此.
我的修复是用拧檬酸钠中,微波中火5min,室温15min,中火5min.降至室温.这样的修复行吗?听说有人使微波中火5min,室温15min,低火20min,这样是否会好些?
我的一抗说明书上称要沸腾20钟,休息10分钟,再来一次,但我担心脱片,没敢这么猛的煮过.
我就的这里挺好的,能向这么多有经验的同志求教.
