zengliuwang

近来我在作TGF-beta1的免疫组化，我用的是老鼠脑组织，冰冻切片，可是作了很多次，都是背景很深，细胞看不见，只是偶尔可以看见阳性细胞，可是师兄师姐都做过，效果还可以。我换了不同的一抗浓度及用别人的二抗看了，仍然没有明显改变，背景仍然很深，也只是偶尔可以看见阳性细胞，而我同时作的另外一个指标效果却很好。请各位指教，到底是什么原因？还有我的冰冻切片冰晶很多，不知道冰晶会有影响吗？冰晶主要形成的原因是什么了？谢谢指教！！

shanghainese

我认为您应该向您师兄师姐好好请教.

冰晶会有结果产生很大的负面影响.冰晶主要形成的原因是冰冻的过程不好,或者是冰冻的组织保存不好.

zengliuwang

我是4％多聚甲醛灌注后，再后固定2到3个小时，然后20％ 、30％蔗糖剃度脱水后，放在－70度冰箱保存后作切的。请问冰晶形成的原因是什么？固定不好？过糖不好？还是冷冻不好？

我师兄师姐作的是石蜡切片，所以也没有很好的意见。

shanghainese

是冷冻不好，还有－70度冰箱保存不好。
冰晶形成的原因是细胞里的水份结冰了。

您为什么不跟着做石蜡切片呢？