心肌细胞HE染色,急急急
各位老师大家好。我最近做心肌细胞的HE染色 ,但是总是做不好希望大家给我点意见。我的具体步骤如下:
1,细胞爬片,先用冷PBS冲洗三次,然后用4%多聚甲醛固定15到20分钟。
2。自来水冲洗3分钟,用苏木紫染色10分钟,自来水冲洗
3,酸酒精分色(2-3秒钟),80%酒精(2-3秒),碱酒精反蓝(1分钟)
4,伊红(2分钟)
5,梯度酒精脱水。二甲苯透明。中性树胶封片。
这是我做HE的基本过程,我主要有一下几个问题:
1,感觉细胞浆,染不红,不知道是什么原因
2,感觉细胞轮廓不明显
3,心肌细胞爬片,上面感觉有很多细胞碎片,怎么让心肌细胞爬片干净一些。
4,我现在觉得是不是固定液,用4%的多聚甲醛,有点浓?
希望有这方面经验的老师给我点建议,片子做不好,实验没法向下进行啊。