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求助HE染色问题

求助HE染色问题

前段时间冰冻切片染色皮肤HE出现着蓝色的不规则影,请大家帮忙分析是什么原因?能否通过石蜡切片染色来克服啊?
同样时间染的正常的图2

[ 本帖最后由 tgq0 于 2009-9-20 11:13 编辑 ]
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我们切皮肤是 按照切脂肪的温度,皮肤的组织皮下组织含有大量结缔组织和脂肪细胞,按照一般组织的温度组织中脂肪很快会融掉,造成组织切片不 完整,粘片出现皱褶!

[ 本帖最后由 6504339 于 2009-9-20 22:42 编辑 ]
生气,是拿别人的错误来惩罚自己      踏踏实实做人,认认真真工作

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哎呀!你看片子厚的!
薄而均匀是前提,后面的才考虑染色!
建议先解决切片厚薄的问题!
请问此片子的厚度多少?

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感谢上面两位高手指教,我切的温度是-27以下,但是感觉表皮真皮层较厚,各层密度不均匀,容易卷片子,所以我有不少标本切的时候切速不一样,每切完一张,就把摇柄后退个15°左右,这样才相对克服切片不卷的问题,但是确实是存在切片厚薄不均的问题,所以我想做石蜡是不是会好点?

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我切的是8um,但是这样切有可能不只这个厚度,昨天我试着调了下时间,把苏木素的时间减少到5分钟,盐酸酒精分化4-6秒,感觉好一些,
  有人指教说可能是切片的时候片子上粘有其他的粹屑引起的,有可能么,我在染色前都用流水洗涤过的呀,
  请问会不会因为我的标本放在甲醛里时间稍长了,引起标本内部酸性物质过多?所以染色的时候非特异结合苏木素了?

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引用:
原帖由 tgq0 于 2009-9-21 16:19 发表
我切的是8um,但是这样切有可能不只这个厚度,昨天我试着调了下时间,把苏木素的时间减少到5分钟,盐酸酒精分化4-6秒,感觉好一些,
  有人指教说可能是切片的时候片子上粘有其他的粹屑引起的,有可能么,我在染色前 ...
难道你染色前都不水洗的吗?

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