九日

此文转自《诊断病理学杂志》2004年2月第11卷第1期

生理盐水在脑组织冷冻切片中的应用
作者：常　峰,丁洪基,李爱英,徐志秀,董艳光,李新功

　　冷冻切片是一种省时快捷的制片方法,有利于临床医师在术中获取病理诊断结果,以便决定手术方案。由于此方法是直接冷冻,故制作出的切片存在一些缺点,如组织形态结构较差、细胞变形等。对脑组织而言,更有组织易脆、切片较碎的不足。我们在工作中利用生理盐水对脑组织冷冻制片加以改进,收到了较好的效果,现介绍如下。
1 　材料与方法
111 　材料　切片机采用德国产MICROM HM560 型恒温冷冻切片机。微波炉为上海中达医学应用研究所生产的快速医学生物实验仪。术中送检脑胶质瘤标本20 例。
112 　方法　将每例标本切成10 mm ×10 mm ×2 mm的多块组织,一组常规冷冻制片;其他组分别置于250 ml 的生理盐水、10 %福尔马林、无水乙醇固定液中,微波炉3 档(350W) 辐射2 min ,将组织表面的水分用滤纸擦去,冷冻制片,HE 染色。
2 　结果
经生理盐水处理的切片在组织结构和细胞形态上都好于常规冷冻切片,经10 %福尔马林处理的切片质量不如常规冷冻切片,无水乙醇处理的组织则无法制片(图1～4) 。
3 　讨论
脑组织富含脂质和水分,温度太低极易出现冰晶和细胞肿胀,易掉片〔1〕。我们在工作中发现,在组织表面即将冻结时切片,可有效减少组织变脆、切片成碎屑状和镜下冰晶多的现象,保证了组织结构的完整性。生理盐水具有固定作用〔2〕, 且可较好地保留细胞结构〔3〕。脑组织质地疏松,微波3 档辐射2 min ,水温在50 ℃左右,可使生理盐水对脑组织渗透均匀,防止了温度过高组织收缩和温度过低固定不足的现象。在以往关于冷冻切片固定液的文献报道中,均是在切片后立即将其放入固定液中,以起到固定作用。我们认为,在组织块被冷冻的过程中,细胞已经发生肿胀和变形,因此应在冷冻前就对组织块进行适当固定,并在切片完成后最后固定,方能真正起到缓和细胞
肿胀、变形的效果。此方法简便易行,生理盐水对技术人员无任何损害,可应用于日常工作中。