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在中药材显微鉴定过程中, 首先需要制作完整、均匀而薄的组织切片。石蜡切片法简便易行, 对一般材料都适用, 且制成的切片质量好, 可永久保存, 是一种被广泛采用的制片方法。但传统的石蜡切片法需时长〔七对于一些质地特异的中药材制片效果不佳, 曾有报道利用聚乙二醇制备纤维性强的药材切片效果良好〔, 。
笔者在多年制作中药材组织切片过程中,究改进了石蜡切片法的某些步骤, 提高了切片质量, 并缩短了制片时间。对于质地较硬、纤维性较强的中药材, 如木类、茎藤类、硬的皮类等用常规的石蜡制片法,组织常易分离破碎, 不易切成片。改进的方法是首先将这类药材按要求取材干药材则需用水润湿浸透, 流水洗净, 视材料大小切成毫米大小的块片状, 分装于具塞指管或小磨口瓶中, 加丙三醇甘油浸没, 隔水蒸6一12小时, 使材料充分软化取出, 再逐级脱水、透明、浸蜡、切片。我们曾用此方法制备了青风藤、黄柏、肉桂等药材的组织切片, 效果良好。在制作石蜡切片时, 各级脱水、透明、渗蜡过程费时较多, 一般在2--3小时, 完成整个石蜡切片过程需近一周的时间。有报道利用“ 生物快速处理仪”制备石蜡切片的方法〔〕, 各级脱水、透明的时间在15一30分钟, 可在较短的时间内完成切片的全过程。目前有专门的快速制备切片的仪器, 但在一般实验室, 没有这种专门的快速制备切片的仪器, 我们利用实验室中普通的超声波清洗仪, 将脱水、透明过程在其中进行, 就大大缩短了处理时间。方法是按要求取材同上, 分装于具塞指管或小磨口瓶中, 然后一起放人超声波清洗仪中进行, 逐级脱水、透明。各级脱水时间视材料的质地而定,叶类、细嫩的根、茎类等幼嫩的材料各级只需10一20分钟对于一些质地较坚的材料, 如较老的根和根茎类材料各级需20-30分钟。同样, 各级透明所需时间也视材料的质地而定,
一般在10一20分钟之间。在完成透明后, 即可移入恒温箱中进行渗蜡, 最后包埋、切片、染色、封藏, 这样在一天内即可完成切片的全过程。我们曾按此方法制备了甘草、人参、当归、贝母茎和叶等的组织切片, 获得良好的效果。
此文转载于《中药材》第20卷第五期
作者：刘惠娟李萍徐路珊