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请问各位老师冰冻切片细胞结构糊涂不清 是何原因

请问各位老师冰冻切片细胞结构糊涂不清 是何原因

一是冰冻切片结构糊涂不清  二是冰冻切片染色红蓝对比如何更清楚 防止过度分化 三是有关冰冻切片冷冻 固定时间  总之 怎么才能把切片质量提上去
我们单位的苏木素和伊红都是购买而来 不自己配置  ,有一次因为苏木素质量不好 而出的片子不好!!请问老师 买来的苏木素和伊红 怎么判断他们的质量好与不好 谢谢老师们!

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1,【冰冻切片结构糊涂不清】是固定有问题,我用的比较偷懒的办法,直接95%酒精,放个10秒吧,切好马上放入,不然结构就有破坏。
2,【染色红蓝对比如何更清楚】 应该和你染色的关系,当然前面固定不好也会有点影响,我一般固定水洗,然后苏木素2分钟到3分钟,水洗分化,兰化,在95%酒精去水,进入伊红马上提出进梯度酒精。冰冻时伊红时间不能长,长了很容易过染。
最好的苏木素是自己配的,当然是材料要好,自己的火候要好。
为人民服务

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1,及时固定,待切片完成后迅速放到固定液中固定,我用的固定液85ml75%酒精+10ml甲醛+5ml冰醋酸,效果还行。切片完成到固定的时间越短越好,你可以切两个面,一个切好放到机箱外,再切另一个面,在同一张玻片上,可以看下效果
2,对比鲜艳,如果不是自己配的苏木素,在充分水洗后,在苏木素的时间可以适当延长一些,记得充分水洗,然后水冲,分化液力度大一些,,然后再充分水洗,尽可能去点分化液,在蓝化液中蓝化,时间也可以长一些,充分水洗,再染伊红,染色我觉得还是水冲洗的 时间和染色时间的控制。一定要充分水洗
3,关于切片,告诉取材人员组织大小要合适,个人觉得,先打好胶水,然后放到机箱中冷冻,待组织周围胶水发白时,理解放下冻头 ,大概近一分钟可以切片,为什么不打好胶水立即用冻头冷冻呢?1,组织变形,2囊壁组织可能影响切面3冷冻时间不好把握,防止冷冻过度,或者冷冻未够,增加切片时间等等

都是个人意见哈,如果有错误的地方请指出,一起学习哈

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同意楼上。AAF固定液,及时固定,水洗充分,染色适当,关于楼上的包埋方法,我在一本病理杂志上看过,说效果好,等胶水发白快完全冻好的时候再用冻锤。

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