star8823823

70%乙醇5h --> 85% 2h -->95%I 1h -->95%II 1h-->100%I 30min -->100%II 30min -->二甲苯20min -->二甲苯I 20min -->二甲苯20min --> 石蜡I 60度 1h -->石蜡II  60度 1h -->石蜡III 60度 1h 包埋。
我开始以为是肝块修得太大了，就 1×1×0.5cm ，0.5×0.5×0.5cm ，0.3×0.3×0.3cm ，结果还是全切碎，为什么……?

dingwei

动物肝脏的本质所决定。有在切片时注意方法，如不冻，慢切。

zhijiu1

肝脏是最容易破碎的组织之一。
我的经验：准备一个盒子（护士们经常用的白色的长方形搪瓷盘，1-1.5寸深的那种，切片前一天加水3/4左右，盖上盖子放冰箱（注一放平，如是风冷冰箱，离出风口远点，免得冷冻时温度降得不均匀，病面不平整。在切片时，现在冰盒里加点水（大约100ml），冰上面盖上纱布。蜡块粗切后修平整后，细切3-5刀，把蜡块放在冰盒的纱布上，室温1小时左右即可。这时开始切片就不会有破碎的问题了。如果还是不行就适当延长一下时间。另外，这样处理的切片在漂片时可能不平整，解决的办法是在低于包埋蜡熔点4-5度（理论值，我一般用40C的，包埋蜡熔点56-58C)的温水里漂片就会展平。还有就是在把蜡块防冰上以前，可先放在温水浴中3-5秒，这样可适当缩短冰上“水化”的时间。